mirRNA-214在心肌损伤、修复和重构中的作用

心肌损伤是心血管疾病的最主要病生理基础，目前尚无保护受损心肌可靠方法，寻找一种新的有效途径则尤为重要。虽然已知心肌损伤后mirRNA-214表达异常，我们的前期工作也提示mirRNA-214似乎具有心肌保护作用，但确切作用未证实。本项目通过调节mirRNA-214的表达，利用氧化应激和缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤，观察其对细胞的保护作用；利用心肌成纤维细胞模型研究对纤维化相关基因表达的影响，并证实通过靶基因PTEN，影响PI3K/Akt及P27的表达和调控相关基因的作用机制。建立动物缺血再灌注心肌损伤模型，以腺病毒为载体转染mirRNA-214到活体心肌组织，用组织病理学、心脏超声影像学、有创血流动力学以及分子生物学技术，评价其对心肌保护和心室重构的影响。本项目将阐明mirRNA-214的心肌保护作用及对修复和重构的影响，揭示其心脏生物学作用，将心血管疾病的治疗引入一个新的领域。

心血管疾病严重威胁人类健康。急性心肌梗死所致的心力衰竭和心率失常是心血管疾病致死的主要原因，心肌梗死后发生心室重构、导致心肌肥厚、心肌纤维化、最终形成心力衰竭。而心力衰竭是心脏疾病的终末阶段，进一步恶化导致死亡。迄今为止，多种治疗仍未取得突破性进展。近年，基因治疗在该领域研究中显示了光明的前景。越来越多的研究表明，miRNA-214在心脏疾病的发生、发展过程中表达异常，我们对miRNA-214对心肌梗死、心肌肥厚、心肌纤维化作用及部分机制进行了研究。我们的研究表明：1、原代培养大鼠心肌细胞中，miR-214通过负调节PTEN的表达调节细胞凋亡，miR-214可抑制细胞凋亡，PTEN可促进细胞凋亡。2、原代培养大鼠心肌成纤维细胞中，miR-214可抑制细胞纤维化，降低胶原含量，增加基质金属蛋白酶含量。3、在心肌梗死大鼠心肌组织中，miR-214通过负调节PTEN的表达调控细胞凋亡，miR-214可抑制细胞凋亡，减少心肌梗死面积，降低HR、LVEDP，增加+dp/dt max -dp/dt min、LVSP、LV/BW，降低左室内径。miR-214表达的增多能够抑制mmp-1的基因表达，以及胶原I、胶原III、MMP-1、TGF-β1的蛋白表达，从而减轻大鼠心肌梗死后心肌重塑中胶原的生成。4、在心脏后负荷增加所致的心肌肥厚中，miR-214可以降低心重体重比，抑制心肌细胞凋亡，降低左室内径，抑制胶原生成，改善心室重构。研究期间发表题为《MicroRNA-214 protects cardiac myocytes against H2O2-induced injury》SCI论文一篇，基本完成了预定实验计划，目前仍有3篇文章正在撰写及投稿过程中。三年中培养硕士研究生5名。使之建立了科学实验的思路、方法，培养了科研工作思维，并可以熟练掌握细胞培养技术、病毒转染技术、心肌梗死、腹主动脉结扎等造模方法，能够熟练应用PCR、WESTERN、病理切片的制作及观察等相关实验技术。