BCL-6/miR-339-5p通路参与乳腺癌细胞恶性演进过程的分子机制研究

新近研究显示，BCL-6基因不仅在淋巴造血系统生理病理过程中发挥重要作用，而且在乳腺上皮细胞分化，增殖和迁移乃至乳腺癌恶性演进等过程中可能也扮演了重要角色，但其机制尚不明朗，可能存在着转录后调控的参与。深入阐明BCL-6在乳腺癌细胞恶性演进过程中的角色及分子机制十分必要。本课题组前期研究显示：微小RNA通过调控靶基因表达在乳腺癌发生发展方面发挥重要作用，特别是miR-339-5p具有抑制乳腺癌细胞侵袭迁移等的功能，并发现其可以抑制BCL-6基因的表达。本项目将在此基础上，首先考察BCL-6对乳腺癌细胞生物学行为的影响，鉴定其下游调控基因及其信号通路，探讨BCL-6参与乳腺癌发展的分子机制；并在此基础上，研究 miR-339-5p对BCL-6基因表达调控的作用机制，分析BCL-6/miR-339-5p通路对乳腺癌生物学行为的影响，为了解乳腺癌侵袭转移等恶性演进行为的分子机制提供新的理论依据。

新近研究显示，BCL6基因不仅在淋巴造血组织生理病理过程中发挥重要作用，而且在多种肿瘤细胞分化，增殖和迁移乃至恶性演进等过程中可能也扮演了重要角色。本研究收集石蜡包埋127例乳腺癌和50例乳腺良性病变组织，通过原位杂交和免疫组化技术分别检测了BCL6 mRNA和蛋白表达，同时使用实时荧光PCR技术检测了收集30例新鲜乳腺癌和25例新鲜乳腺良性病变组织以及常见8株乳腺上皮细胞BCL6 mRNA表达；其次，以乳腺癌MCF-7和 T47D为一对模型细胞，分别采用过表达和siRNA干扰的方法，考察BCL-6对乳腺癌细胞生物学行为的影响；并且，我们建立BCL6过表达MCF7细胞的荷瘤裸鼠模型，通过体内实验观察BCL6对乳腺癌细胞生长等行为影响；我们进一步鉴定了BCL6上游的调控miRNA和下游调控基因及其信号通路。研究发现：乳腺癌组织和细胞株中BCL6表达显著高于乳腺良性病变组织和正常乳腺上皮细胞株，并且其表达与乳腺癌分期和淋巴结转移等临床病理特征和患者预后密切相关；体外实验显示BCL6可以促进乳腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭，抑制细胞凋亡；体内研究显示BCL6可以促进小鼠皮下肿瘤生长和侵袭；BCL6是miR-339-5p的直接靶基因，并且miR-339-5p通过下调BCL6抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭；BCL6可以上调肿瘤细胞CXCR4和cyclinD1 表达。本研究显示：miR-339-5p/BCL6参与了乳腺癌的恶性进展，BCL6可能是乳腺癌进展的标志物和将来潜在的治疗靶点。