红树植物-角果木根系盐应答基因表达谱的构建及耐盐基因克隆

红树植物在长期的自然选择下，形成了一套有别于甜土植物的盐胁迫适应机制，是一种真正意义上的耐盐植物。通过研究红树植物特有的耐盐途径，比较其与淡水植物盐应答的不同，可以直接找到植物耐盐的某些方式。有利于进一步弄清植物耐盐的分子机制。在此基础上，克隆出一些重要的抗（耐）盐基因加以应用，将为耐盐作物分子育种奠定基础。本项目拟采用SSH结合cDNA macroarry技术研究强耐盐性红树植物-角果木在盐胁迫和非盐胁迫条件下的基因差异表达谱，从表达谱层面剖析红树植物耐盐的分子基础；结合表达谱分析、反向Northern杂交、测序和生物信息学分析等手段，筛选出红树耐盐相关基因（EST）2-3个；经RACE技术分离全长cDNA，进一步通过拟南芥中的转基因研究进行功能分析，从而获得一些耐盐新基因。项目的实施将为揭示红树植物耐盐机制及通过基因工程手段改良植物耐盐性提供理论基础和基因资源。

红树植物在长期的自然选择下，形成了一套有别于甜土植物的盐胁迫适应机制，是一种真正意义上的耐盐植物。通过研究红树植物特有的耐盐途径，比较其与淡水植物盐应答的不同，可以直接找到植物耐盐的某些方式。有利于进一步弄清植物耐盐的分子机制。在此基础上，克隆出一些重要的抗（耐）盐基因加以应用，将为耐盐作物分子育种奠定基础。.本项目对红树植物-角果木盐胁迫（500 mmol•L-1）后不同时间点的根系进行了细胞生物学、生物化学的研究，选定了进行差异基因筛选的各时间点，并采用最新的高通量测序技术-RNA-seq对处理不同时间点的根系样品进行转录组和数字表达谱测序；根据表达谱分析结果，候选了40个基因进行半定量和realtime验证，并根据测序和表达验证结果，候选了其中8个基因进行了载体构建，通过酵母表达和拟南芥转基因研究对这些基因的功能进行了分析。已获得能提高酵母和拟南芥耐盐性提高的新基因3个。培养研究生3名，本科生5名，发表相关论文5篇，3篇在投。完成了原定研究任务。项目的实施为揭示红树植物耐盐机制及通过基因工程手段改良植物耐盐性提供了理论基础和基因资源。