miR-155通过抑制IL-18/IL-18BP诱导足细胞焦亡促进狼疮性肾炎的作用机制研究

Lupus Nephritis (LN) is one of the most common and serious complications of Systemtic Lupus Erythematosus (SLE), the podocyte pyroptosis i is an important part in the occurrence and development of LN, whereas the role of podocyte pyroptosis in LN and the mechanism still remain unclear. Our previous studies have found that the miR-155 can promote podocyte pyroptosis and induce cascades of inflammation by targeting Interleukin-18-binding protein (IL18BP),Suggesting that miR-155 can promote the development of LN through the induction of the pyroptosis by inhibiting the expression of IL-18/IL-18BP. this project will firstly analyze the molecular mechanism of miR-155 in regulating IL18BP and podocyte pyroptosis in the cellular level, and the mechanism of miR-155 in inducing LN in animal level. Then the miR-155 knock out mice will be used to research the function miR-155 in the process of pyroptosis and LN development. Furthermore, the clinical samples will also be used to validate the role of miR-155 in pyroptosis by targeting IL18BP and regulating IL18 pathway. This research will confirm the relationship between podocyte pyroptosis and the pathogenesis of LN, provide important theoretical basis and data support for new strategies in LN treatment.

狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮（SLE）最常见和最严重的并发症之一，足细胞焦是LN发生发展的重要环节，但足细胞焦亡在LN发生发展中的作用及其分子机制不清楚。课题组前期研究发现miR-155通过靶向IL-18BP促进足细胞焦亡诱发炎症级联反应，提示miR-155可能通过抑制IL-18/IL-18BP诱导足细胞焦亡促进LN的发生发展。本项目拟首先在细胞水平探讨miR-155通过调节IL18BP促进足细胞焦亡的分子机理，并在动物水平观察miR-155诱发LN的作用机制，再基于基因敲除动物模型深入研究miR-155调节IL18/IL18BP信号通路、促进足细胞焦亡、导致LN发病的炎症反应进程，进一步通过临床实验验证miR-155/IL18/IL18BP调控足细胞焦亡、促进LN的作用。本研究将明确足细胞焦亡与LN发病的关系，为寻找治疗LN的新策略提供重要的理论依据和数据支撑。

背景：狼疮性肾炎（LN）是SLE最常见和最严重的并发症之一，足细胞焦亡是LN发生发展的重要环节，但足细胞焦亡在LN发生发展中的作用及其分子机制尚未清楚。.研究内容：细胞层面通过RT-qPCR、Western Blot、免疫荧光、慢病毒、双荧光素酶报告基因实验等，研究miR-155与IL-18/IL-18BP间的调控作用和miR-155通过Foxo3a/ARC通路调控足细胞焦亡的分子机制；动物层面构建培育重症LN模型小鼠、敲除 miR-155的LN模型小鼠，通过RT-qPCR、Western Blot、组织病理、透射电镜、免疫荧光等，研究miR-155、足细胞焦亡与LN的关系，以及miR-155与IL-18/IL-18BP促进足细胞焦亡从而对LN的致病过程的作用。临床层面收集人外周血单个核细胞、尿沉渣，通过RT-qPCR、临床数据、相关性分析等，研究了miR-155 、IL18BP、细胞焦亡与LN患者临床特征相关性。.重要结果和关键数据：足细胞焦亡中miR-155表达量升高，miR-155可以靶向调控IL-18BP和Foxo3a, miR-155可以通过调控IL-18BP进而调控IL-18的表达，miR-155通过Foxo3a/ARC通路调控足细胞焦亡。实验动物与对照组相比，miR-155在LN组表达增多，LPS重症小鼠模型中miR-155表达量进一步升高，miR-155-/-组LN模型小鼠miR-155表达量明显减少，肾损伤、细胞焦亡因子在各组中和miR-155具有相同趋势；IL-18BP与miR-155具有相反趋势；miR-155、细胞焦亡因子的表达量与LN病情成正相关，抑制miR-155的表达可以减轻足细胞焦亡；miR-155可以通过IL-18BP减少IL18诱导的免疫反应，以及可能通过Foxo3a/ARC通路抑制足细胞焦亡从而改善LN的症状及预后。狼疮性肾炎患者PBMC中miR-155-5p、IL-18BPmRNA、焦亡因子mRNA表达均升高；尿沉淀细胞中IL-18BPmRNA、焦亡因子mRNA表达均升高，miR-155-5p表达降低；miR-155及焦亡相关因子表达与LN的病情呈正相关，miR-155、焦亡炎症因子可作为LN的新型炎症标志物。.科学意义：研究成果从新的视觉阐明LN的发生机制，为LN的诊治策略提供新的理论依据和新靶点，具有重要的科学价值和应用价