miR-508-5p调控胃癌多药耐药的机制研究

多药耐药是胃癌化疗失败的主要原因，其根本分子机制仍不清楚。本研究所近年发现多个miRNA在胃癌耐药细胞和亲本细胞中差异表达，率先揭示了miRNA在胃癌多药耐药中的重要作用。我们前期通过miRNA文库筛选，发现6个可以明显逆转胃癌耐药的miRNA,其中miR-508-5p作用最强。生物信息学分析发现p53是miR-508-5p的潜在转录因子，靶基因预测和western blot结果表明ABCB1、ZNRD1、RPL23是hsa-miR-508-5p潜在靶基因。本项目拟采用基因表达谱芯片与iTRAQ技术全面筛选miR-508-5p的其他重要靶基因，利用CHIP、EMSA等技术研究miR-508-5p的转录调控机制，以期证明p53/miR-508-5p/ ABCB1、ZNRD1、RPL23（其他靶基因）信号通路调控胃癌多药耐药的具体机制，为逆转胃癌多药耐药提供新思路。

多要耐药与胃癌患者的治疗失败及不良预后密切相关。本项主要研究内容为探讨miR-508-5p调控胃癌多药耐药的生物学功能及具体分子机制以及miR-508-5p在胃癌耐药细胞中表达下调的上游调控机制。目前主要取得的研究结果为：1.项目初期我们通过microRNA 模拟物文库运用实时高通量功能筛选的办法筛选获得11个可以逆转胃癌多药耐药细胞耐药表型的microRNA分子，其中miR-508-5p是逆转功能最强的一个分子，其在胃癌耐药细胞与亲本细胞中呈差异表达；2.体内、体外功能实验进一步确定miR-508-5p可以明显逆转胃癌耐药；3.胃癌多药耐药相关经典分子ABCB1、ZNRD1是miR-508-5p的两个直接功能靶基因；3. miR-508-5p、ABCB1、ZNRD1三个分子形成调控环路，在胃癌多药耐药中发挥重要作用；4. 前期功能筛选获得的另外一个胃癌多药耐药相关microRNA分子miR-27b通过调控CCNG1-P53轴，进而调控miR-508-5p的表达，揭示了miR-508-5p在胃癌多药耐药细胞中下调的上游调控机制。该项目目前取得的结果表明miR-27b/CCNG1/P53/miR-508-5p分子轴在胃癌多药耐药中发挥着关键作用，为临床上逆转胃癌多要耐压表型及预测胃癌化疗敏感性提供了新的潜在分子靶点及分子标志物。