Huwe1在早期胚胎发育中的功能研究及异常表达与早期妊娠丢失的关系

辅助生殖技术（IVF）对于子代表观遗传学的影响日益得到关注。目前已有报道在IVF本身增加了子代表观遗传异常而致的儿童期某些肿瘤发病率增高。染色质中组蛋白修饰在表观遗传中作用重大。本研究以课题组在前期流产病人中观察到的一个表达显著降低的，在生殖系统高表达的泛素化E3降解酶Huwe1在早期胚胎发育中的作用为研究对象，拟检测在小鼠体外授精获得的早期胚胎发育的过程之中，不同发育阶段的胚胎Huwe 1的表达及RNA干扰后对早期胚胎发育的影响，以及其与胚胎p53基因表达与组蛋白修饰的相关性，从而获得早期胚胎发育表观遗传信息的更多的信息。同时在IVF操作可能的低氧和应激等环境对Huwe1相关的信号通路的影响做系统研究，最后再通过比较IVF操作后流产与自然流产，人工流产等不同类型流产病例中，检测胚胎绒毛中这一通路的变化，将为了解辅助生殖技术对胚胎的泛素化过程及相关的表观遗传学调控提供科学依据。

本课题为了研究早期胚胎发育中的HUWE1的功能以及辅助生殖技术体外操作后可能对子代表观遗传学的影响，从精子的研究出发，系统的研究了HUWE1不同精子状况、不同处理的着床前胚胎和胚胎植入后绒毛中的表达情况，结果发现HUWE1在异常质量的精子中表达降低，2-细胞胚胎开始表达HUWE1。通过小鼠胚胎体外注射HUWE1siRNA，发现HUWE1可能作为一个受氧化应激影响的因子，在晚期胚胎发育中影响胚胎的凋亡，影响胚胎着床及着床后发育;虽然经过Huwe1干扰的早期胚胎在各期别胚胎形成率与阴性对照和未注射组差别不大，但是囊胚形成率有明显差别，说明HUWE1在早期胚胎发育中对基因组的激活和正常的组蛋白修饰起关键作用，从而影响着床前囊胚的发育；在人类辅助生殖技术之后获得妊娠又出现流产病人中，绒毛中HUWE1的蛋白表达明显低于自然妊娠后人工流产病人的绒毛，因此提示由于体外操作的影响，可能使胚胎在培养过程中出现的培养条件如应激、低氧等环境变化或遗传因素的引起的Huwe1基因的变化对其他某些蛋白通路的影响可能是导致早期胚胎发育停止的病因学基础之一。