大鼠腹外侧视前区腺苷对睡眠-觉醒节律调控的研究

随着现代生活节奏的加快和生活方式的改变，各种睡眠障碍性疾患日益成为突出的医疗和公共卫生问题。睡眠医学作为新兴的学科还有很多未解之谜。腺苷是一种在体内广泛存在的嘌呤核苷酸，它不仅是能量代谢的中间产物，还是一种重要的神经调质。目前已有大量的药理学和行为学证据显示腺苷是一种内源性睡眠物质，然而其对睡眠-觉醒节律的调控机制仍不明确。本研究运用自由活动脑电图记录、HPLC递质检测，共聚焦免疫荧光受体检测和离体脑片细胞内膜电位记录技术等，拟通过正常大鼠和睡眠剥夺大鼠实时检测大脑睡眠调节的关键部位腹外侧视前区（VLPO）腺苷水平的变化与睡眠-觉醒节律的关系，探索腺苷对睡眠与觉醒的调控是通过何种腺苷受体亚型介导及其相关核团之间的调控途径和机制。以期探讨腺苷在睡眠-觉醒节律的调节作用及其作用机制，为更好地提高人类睡眠质量以及临床开发治疗睡眠障碍类药物提供理论指导。

随着现代生活节奏的加快和生活方式的改变，各种睡眠障碍性疾患日益成为突出的医疗和公共卫生问题。腺苷是一种在体内广泛存在的嘌呤核苷酸，它不仅是能量代谢的中间产物，还是一种重要的神经调质。已有大量的药理学和行为学证据显示腺苷是一种内源性睡眠物质，然而其对睡眠-觉醒节律的调控机制仍不明确。本研究运用自由活动脑电图记录、HPLC递质检测和共聚焦免疫荧光受体检测等，结果发现下丘脑腹外侧视前区（VLPO）内微量注射AD促醒效应持续4个小时，减少非快眼动相（NREM）睡眠和快眼动相（REM）睡眠时间及总睡眠时间（TST），并且增加长时程觉醒波、短时程NREM波出现次数，减少中等持续时间REM波和NREM波出现次数；VLPO内微量注射AD转运体抑制剂NBTI5小时后，觉醒时间增加，NREM睡眠和REM睡眠时间及TST减少，长时程觉醒波出现次数增加，中等持续时间REM波和NREM波出现次数减少；VLPO内微量注射A1R选择性激动剂CHA 5小时内增加觉醒时间，减少NREM睡眠和REM睡眠时间及TST，增加长时程觉醒波出现次数，减少短时程觉醒波、中等持续时间REM波和NREM波出现次数；VLPO内微量注射A1R选择性拮抗剂CPT 5小时内，觉醒时间减少，而NREM睡眠时间和TST增加，并且中等持续时间觉醒波、短程及中等持续时间NREM波出现次数减少，长时程NREM波出现次数增加，觉醒与NREM睡眠之间的转换次数减少，对NREM睡眠向REM睡眠、REM睡眠向觉醒的转换次数不影响；VLPO内微量注射cAMP 5小时内减少觉醒时间，增加NREM睡眠时间及TST。VLPO联合给予U-73122和AD 5小时内的觉醒时间减少，REM睡眠时间及TST增加。这些结果揭示睡眠调节中枢VLPO的腺苷参与睡眠-觉醒的调节；腺苷在VLPO通过A1R发挥促醒作用；受体-G蛋白-AC途径和受体-G蛋白-PLC途径参与了A1R介导的促醒作用。此外，在睡眠剥夺大鼠上，随着睡眠剥夺的进行，AD含量在VLPO内逐渐升高，并维持相对较高的水平；当睡眠剥夺结束后，AD含量出现迅速下降；通过药理学实验验证AD及其A1R参与睡眠稳态调节。这些研究对揭示腺苷在VLPO对睡眠调控机制及为临床开发治疗睡眠障碍类药物提供理论指导。