神经轴突诱导因子SEMA3F通过Hippo信号通路抑制DLBCL增殖及侵袭的机制研究

Diffuse large B cell lymphoma is one of the most common non-hodgkin lymphoma, expression myc and Bcl2 is associated with poor outcome in DLBCL patients, and the detailed underlying mechanism is poorly known. Our previously study found that axon guidance factor semaphorin-3f (SEMA3F) could inhibit the expression of myc and Bcl2, further study have demonstrated that SEMA3F can influence formation of complex between YAP and ZO-2 in Hippo signaling pathway, the current proposal will bring forward that SEMA3F can inhibit DLBCL cell proliferation and invasion via Hippo signaling. We aim to demonstrate that SEMA3F can inhibit DLBCL cells proliferative and invaive capacity in vitro. After in situ xenograft is estabilised in nude mice, the effects of SEMA3F on tumorigenesis and invasion will be explored. Meantime, the impact of Hippo signaling pathway on the biological effects mediated by SEMA3F will be investigated, and indentify the molecular mechanism of SEMA3F on tumor growth and invasion, the significance of clinical diagnosis and therapeutic strategy. Our study will help the field to understand the tumorigenesis and progress of DLBCL, which will highlight the significance of novel and potential targets for future therpeutic approaches in cancer.

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是最常见的非霍奇金淋巴瘤，myc及Bcl2的阳性表达是影响其预后的重要分子，但具体机制尚不清楚。前期研究结果发现神经轴突诱导因子SEMA3F可抑制肿瘤细胞myc及Bcl2的表达，进一步研究发现SEMA3F可影响Hippo信号通路中YAP/ZO-2复合体的形成，因此本项目提出“SEMA3F通过Hippo信号通路抑制DLBCL增殖及侵袭”的假设，拟通过体外培养原代细胞及DLBCL细胞系，证实SEMA3F对DLBCL的增殖及侵袭能力的负向调控作用，采用体内成瘤模型探索其对DLBCL细胞的肿瘤形成能力的影响。进一步解析Hippo信号通路在SEMA3F介导的生物学功能中的作用，证实SEMA3F调节DLBCL增殖及侵袭的分子机制，并评估其治疗意义。研究结果将对于认识DLBCL的发生与发展具有重要意义，对探索更为有效的诊疗策略和改善患者预后提供新的思路。

弥漫性大B细胞淋巴瘤（Diffuse large B cell lymphoma, DLBCL）是最常见的非霍奇金淋巴瘤（NHL）亚型，约占NHL的30%-40%，其生物学特性和临床表现具有异质性。目前随着对DLBCL治疗方案的改进，尤其是分子靶向药物利妥昔单抗的出现，使DLBCL的治疗效果得到显著的提升，然而仍然有约40%的患者在治疗过程中出现耐药/复发，而这部分患者的预后极差。因此寻找能预测DLBCL治疗效果的分子标记具有重要的临床意义，同时如何有效提高DLBCL患者的治疗效果是临床亟需解决的关键问题。. 神经轴突诱导因子semaphorin-3F（SEMA3F）是神经轴突发育过程中起重要导向作用的因子，其可通过其受体PlexinA1及NRP对细胞的正常生物学功能进行调节。在国家自然科学基金委的资助下，课题组采用体内外模型、临床资源及公共数据库，评估了SEMA3F在DLBCL的表达水平，并深层次地探讨了其抑制淋巴瘤增殖及逆转耐药的机制。相关重要研究结果如下：1）SEMA3F在肿瘤组织和淋巴瘤细胞系的表达水平比正常粘膜及淋巴结低。2）在DLBCL细胞中过表达SEMA3F能够诱导肿瘤细胞发生凋亡，而沉默SEMA3F的表达能够增强肿瘤细胞的活力。3）进一步我们发现SEMA3F能够通过Hippo信号通路抑制淋巴瘤细胞的增殖。4）通过对GEO公共数据库分析，我们发现在接受含利妥昔单抗治疗的DLBCL患者中， SEMA3F的表达与患者的预后密切相关。5）沉默淋巴瘤细胞SEMA3F的表达可抑制CD20的表达，采用外源YAP抑制剂处理细胞后，CD20的表达可部分回复，且转录因子TEAD2发挥关键作用。本项目在实施期间，共发表SCI论文3篇，培养研究生1名。.本课题组较好地达到了预期研究目标，针对SEMA3F生物类似物的合成及Hippo信号通路涉及特异的小分子抑制剂，将为DLBCL的临床治疗靶点的选择提供了理论依据