基于磁性纳米粒子的亲和富集方法研究

基于生物特异性相互作用的免疫富集方法是复杂体系中特定成分提取的有效手段之一，通过免疫亲和富集，可以快速纯化样品，特别是多标的免疫体系的设计与实现，为特定结构类似物的提取建立了基础。本课题主要目标是通过磁性纳米粒子的研究及其与抗体等具有亲和富集能力的生物大分子结合，建立通过磁场作用下简单快速的免疫富集过程，将免疫富集从离线、整体柱在线等模式发展到磁场控制的均相/固相分离模式，为免疫亲和富集建立一种新的简单且易自动化操作的模式。

本子课题以化学合成为基础，着眼于磁性纳米材料免疫亲和富集方法及蛋白质糖基分析新方法的建立。课题开展了磁性纳米颗粒的合成与包裹研究，分析不同的固定化方法对抗体特异性和亲和能力影响，成功实现了T细胞的磁性捕捉与分离。开发了一种新型的糖标记化试剂，建立蛋白质糖基分析的CE-MS方法，该方法灵敏度与HPLC-MS相当；同时开展同位素标记方法，建立对蛋白质糖基化的定量检测。结合相关子课题组的不同形态的细胞的蛋白质谱的解析，为理解细胞状态提供依据。本课题发展的方法将在蛋白质组学以及细胞生物学研究领域中具有极大的应用前景。