妊娠期超抗原SEB对子代出生前后细胞免疫的"印迹"效应及其机理研究

基本信息
批准号:81070506
项目类别:面上项目
资助金额:30.00
负责人:管俊昌
学科分类:
依托单位:蚌埠医学院
批准年份:2010
结题年份:2013
起止时间:2011-01-01 - 2013-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:闵宏林,刘勇,刘婷婷,赵芳芳,徐志本,高淑娴,刘从森,孔晓明,徐燕
关键词:
甲基化SEB细胞免疫印迹妊娠
结项摘要

金葡菌肠毒素B(SEB) 是金葡菌及其L型的主要致病物质,也是主要的超抗原。我们前期研究发现SEB影响体外培养全胚胎的生长发育及诱发免疫细胞的凋亡,但妊娠期母体接触SEB对子代细胞免疫影响的研究国内外尚无报道。本研究拟对妊娠期母鼠注射SEB,观察SEB对子代小鼠出生前后细胞免疫的印迹效应及其机制,采用流式细胞术、抗体双染标记法及胸腺器官培养等方法检测新生鼠及成年子代鼠的胸腺细胞生长发育;用流式细胞术、ELISpot、real-time PCR、放射免疫法及细胞培养等检测新生鼠及成年鼠脾脏中T细胞的活化与增殖;甲基化检测胎鼠、成年子鼠及再次接触SEB大鼠的脾脏中IL-2、IL-4、TNF-α及IFN-γ等基因的甲基化程度等。研究妊娠期接触SEB对子代鼠细胞免疫的影响及其"印迹"效应,并探讨印迹机制与成年后一些免疫性疾病的关系,为寻找这些疾病的发病机理与病因奠定实验基础,为后期研究做铺垫。

项目摘要

本项目通过妊娠期孕鼠给予SEB,通过流式细胞术、ELISA、放免法、新生鼠胸腺器官体外培养法及MeDIP-qPCR方法观察SEB对子代鼠细胞免疫的近期及远期影响,揭示其对细胞免疫的印迹效应及其机制。具体研究结果为:⑴妊娠期孕鼠接触SEB可明显改变新生鼠胸腺、脾脏及外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD8+TCR Vβ8.2+ T及CD4+TCR Vβ8.2+ T细胞的比例,并改变体外培养的新生鼠胸腺器官中双阳性胸腺细胞(DP)向单阳性胸腺细胞(SP)的成熟过程,揭示孕期给予SEB可明显影响新生鼠T细胞的发育和比例;⑵当新生鼠生长至成年后,检测发现其细胞免疫的变化与新生鼠时期变化相似,揭示新生期的变化可保留至成年期,形成印迹;⑶成年子代鼠再次接触SEB时可明显减少胸腺、脾脏及外周血CD4+ T细胞的比例,而增加CD8+T细胞的比例,揭示妊娠期给予SEB可改变成年子代鼠对SEB再次刺激的免疫应答反应;⑷甲基化检测发现成年子代鼠脾脏中IL-4及INF-γ基因的甲基化水平均较对照组明显减少,提示妊娠期SEB对子代鼠细胞免疫的印迹效应的机制可能与IL-4及INF-γ基因的甲基化方式改变有关。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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