轻微型肝性脑病认知功能障碍特异性代谢物谱分析及大黄煎剂干预作用研究

基于前期国家自然科学基金等课题的研究发现，采用中医通腑开窍法的大黄煎剂保留灌肠治疗肝性脑病（HE）疗效肯定，其抗HE效应通过抑制肠道内细菌的成长、降低肠道PH值、阻止肠道NH3的吸收及保护肝细胞线粒体的结构和功能等途径实现。本项目应用代谢组学、神经心理学等多学科技术与方法，探讨轻微型肝性脑病（MHE）认知功能障碍特异性代谢物谱及大黄煎剂的干预作用。采用中央随机、双盲、多中心临床研究方法，运用UPLC-QTOFMS和GC-TOFMS等现代分析仪器，结合生物信息学及模式识别等数据分析技术，通过对受试者代谢物谱分析，确立MHE特异性生物标志物群，揭示MHE认知功能障碍发病机制。并通过MHE分组治疗，观察MHE认知功能、代谢物谱间动态变化规律，分析数据相关性，评价中药临床疗效，揭示中药干预机制，为大黄煎剂有效临床实践提供新的科学依据，为MHE诊断和防治研究拓宽思路。

背景：轻微型肝性脑病（MHE）是肝性脑病的一个特殊类型，该病通常没有典型的肝性脑病的表现，但采用精细的神经生理和心理检查方法可检测出异常结果。MHE如不能及时处理则会进展为临床型肝性脑病，从而增加患者的死亡率。因此，早期诊断及治疗MHE具有重要的临床意义。.主要研究内容：.1、运用代谢组学检测方法对受试者血清、尿液进行代谢组学比较研究，确定MHE特异性生物标志物，并对这些标志物进行分析。.2、通过生存质量检测、NCT及DST试验、血氨、肝功能生化指标等分析大黄煎剂治疗MHE效应及对MHE认知功能的影响作用。.3、分析大黄煎剂对MHE代谢物谱的影响，分析MHE患者认知功能损伤与其体内代谢物变化的生物学机制，研究大黄煎剂保留灌肠对MHE认知功能、特异性代谢物谱的影响。.重要结果、关键数据及其科学意义：.1、MHE患者与正常人血清代谢物相比，在正常人群（NC组）和轻微型肝性脑病患者（MHE组）血清中找到60种差异性代谢物，其中下调22个，上调38个，这些物质可能为MHE的标志物。.2、大黄煎剂灌肠后的干预作用：可显著改善MHE患者认知功能；在NCT-A、DST、WHO QOL-BREF评分、降血氨、改善肝功能方面疗效与乳果糖组相当（P>0.05）。.3、使用大黄煎剂、乳果糖治疗前后MHE患者的代谢物谱无明显差异（P>0.05）。造成上述结果的原因可能有：（1）大黄煎剂、乳果糖可能是通过影响MHE患者体内其他分子量较大的物质而起作用，而代谢组学方法无法检测到这些物质；（2）超低温冰箱使用频率高，温度有时可能未达到-80℃，导致标本在冻存过程中出现代谢物质变化。此外，标本在运送过程中可能会因振荡或者温度升高等因素而产生溶血，影响代谢物结果分析；（3）血清标本从采集到最终检测的过程中，样本有可能在离体条件下发生代谢活动，从而影响样品中代谢物的质和量的改变，可能会对受试者真实的代谢物谱产生干扰；（4）受目前的代谢组学技术水平所限，可能未能分析出特异性差异性代谢物，待今后新的数据库完善更新后再进行检测。