我国再引入普氏野马的遗传多样性研究及管理体系的构建

本项目拟针对我国普氏野马保护生物学实践上存在的紧迫问题，采用非损伤的研究途径，以线粒体DNA的D-Loop基因片段的序列分析、核基因组的微卫星分析、以及功能基因MHC分析技术，开展我国普氏野马的保护遗传学研究，采用多种标记、多个标记位点，对整个种群全基因组进行扫描，依据野马群体的遗传信息表现，评价其整体遗传多样性水平，比较我国与国外普氏野马的种群遗传多样性异同；结合系谱记录，进一步确定亲缘关系，指导野马群体的繁育，避免野马种群分化，减小遗传漂变，最大程度保持建群者的遗传多样性逐代传递下去；在此基础上，遴选遗传背景清楚的个体，制定新放归个体及其群体的组配，增加基因交流，丰富群体的遗传杂合性，提高其适应环境变化的潜力，使放归野化种群能够正常而良性地稳定发展。整合以上研究内容，进而对我国普氏野马种群的生存状况做出科学评估，以期为我国普氏野马的保护及管理对策的制定奠定坚实的保护遗传学理论基础。

本项目采用非损伤的研究途径，以线粒体DNA和MHC基因相关片段的序列分析开展我国普氏野马的保护遗传学研究，对我国三个普氏野马种群的遗传背景进行调查，依据野马群体的遗传信息表现，评价其整体遗传多样性水平；在新疆吉木萨尔种群、新疆卡拉麦尔种群和甘肃种群中发现2个单倍型，结合已有的系谱记录，确定了部分个体的亲缘关系，筛选稀有等位基因和单倍型，指导野马群体的繁育，从而避免在野马种群内的分化，减小遗传漂变的影响，最大程度保持建群者的遗传多样性逐代传递下去；在新疆吉木萨尔种群和甘肃种群中，利用座位特异性的PCR-SSCP基因分型和测序方法对ELA-DQA﹡exon2的遗传变异进行检测，共克隆出7条等位基因，与其他濒危哺乳动物相比，普氏野马在ELA-DQA﹡exon2基因座的基因多态性较低。吉木萨尔种群的Ne和 PIC值均高于甘肃种群，表明吉木萨尔种群在该基因区的多态性高于甘肃种群。等位基因序列分析，7条等位基因间的核苷酸遗传距离为0.012-0.161，泊松校正的氨基酸遗传距离为0.01-0.334，证明普氏野马在该基因区具有较高的变异性。从DQA系统发育树得出普氏野马与家马、野驴聚在一起，三者在系统发育中有很近的亲缘关系。经χ2检验，2个普氏野马种群等位基因频率和基因型频率均未处于Hardy-Weinberg平衡状态。综上，普氏野马在人工繁殖及放归种群奠基个体的选择，应充分考虑MHC基因的分布，选取具有代表性的个体进行人工繁育及组成放归种群，尽可能地提高种群的MHC多样性，增强其抵抗各种病原体的可能性。