从豌豆克隆了coplcDNA,在大肠杆菌中表达了GFPCOPI融合蛋白,制备了多克隆抗体。根据COPL的蛋白结构设计了四种不同的结构域基因片段,分别构建了与GFP的融合基因转化烟草获得了组成型表达的转基因烟草,通过对比分析这些外源基因在转基因烟草中过量表达所引起的表型变化,以及不同光暗条件对它们的表达和亚细胞定位的影响,对豌豆COPI蛋白及不同结构域蛋白的生理功能进行了初步研究。结论表明,豌豆COPI作用机制和生理功能和极南芥的COPI是基本相同的,仅存在微小的差异。除了三个极保守的特征结构域,我们的实验结果也证实了COPI还存在着细胞质定位信号和细胞核定位信号。这些结论对于完善COPI的作用机理有着重要的意义。
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数据更新时间:2023-05-31
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