补骨脂制剂及其主要单体逆转乳腺癌干细胞多药耐药的实验研究

乳腺癌是女性头号杀手，化疗是术后最重要辅助治疗手段，但癌细胞对化疗药物产生多药耐药常常致化疗失败。肿瘤干细胞处于G0/G1期、耐药基因及其编码蛋白高表达等因素可能是导致肿瘤细胞耐药的主要原因。逆转肿瘤干细胞多药耐药有望提高化疗疗效或达到新的突破。祖国中药具有多靶点效应的作用特点，弥补了西药作用机制单一、毒性大、不良反应多的不足，在逆转肿瘤多药耐药方面优势明显。国内多项研究显示补骨脂有确切的逆转肿瘤多药耐药的功效，但其作用机制尚不明确。本研究拟通过体外建立阿霉素乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM，从中分离出耐药乳腺癌干细胞，利用不同浓度的补骨脂制剂及其主要单体（补骨脂素、异补骨脂素）对耐药乳腺癌干细胞实施逆转，检测逆转前后其细胞周期、相关耐药基因及其编码蛋白表达水平的变化，探讨补骨脂逆转乳腺癌干细胞多药耐药的作用机制，为推动祖国医学在逆转肿瘤细胞多药耐药方面的发展提供新的理论依据。

补骨脂素是补骨脂的主要活性成分。在本研究中，我们分析了补骨脂素对MCF-7 / ADR及对分选出的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的逆转耐药作用和抗肿瘤机制。通过测定细胞活力，MTT法来评价补骨脂素的细胞毒性和逆转MDR作用。通过流式细胞术（FCM）补骨脂素处理后对细胞周期和凋亡的影响，以及胞内药物积累和罗丹明123的外排功能和P-gp的表达水平。通过ATP消耗评估P-gp的ATP酶活性。结果表明补骨脂素逆转MDR是通过抑制ATP酶活性，而不是降低P-gp的表达；补骨脂素抑制MCF-7 / ADR细胞的增殖，将细胞周期阻滞在G0 / G1期，诱导细胞凋亡。我们的结果还表明，补骨脂素可能通过抑制NF-κB核转录从而抑制上皮间质转化（EMT）引起的细胞侵袭迁移，具体机制还待进一步深入研究。我们的研究对补骨脂素在MCF-7 / ADR细胞及对分选出的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的逆转耐药和抗肿瘤效果做了系统和详细的描述，为天然化合物作为新型抗癌剂的探索提供的了理论依据。