点阵激光对中国人光老化皮肤治疗作用机制的研究

点阵激光可有效治疗高加索人种光老化皮肤的皱纹和不规则色素沉着，然而其确切的治疗机理尚未得到深入的研究，在华人的应用也未得到临床的广泛验证。本课题拟使用超脉冲二氧化碳点阵激光对中国人单侧面部及前臂光老化皮肤进行治疗，另一侧作为自身对照。用活体激光共聚焦显微镜及其他无创性皮肤生物工程学技术实时监测皮肤性状的改变；用电镜观察胶原蛋白、黑素细胞、嗜黑素巨噬细胞微观结构的改变；用免疫组化方法检测胶原蛋白、弹力蛋白的表达，以及调控基质代谢的基质金属蛋白酶家族成员、转化生长因子β及其受体的蛋白表达情况；分析黑色素、黑素颗粒、黑素细胞的分布/表达；用实时荧光定量RT-PCR检测上述指标mRNA表达情况。从色素代谢和胶原代谢两个方面阐述点阵激光改善光老化皮肤的细胞生物学行为，探讨点阵激光治疗皮肤光老化的作用机理。

本课题使用超脉冲二氧化碳点阵激光对中国人面部、后背及前臂光老化皮肤进行治疗，并设立自身对照。完成情况如下：1、总结300例完成点阵激光治疗的患者资料，发现一次治疗后，1个月左右可看到改善，3个月改善显著，6个月和一年随访仍有进一步的改善。因此推断点阵激光能激活创伤修复机制，皮肤发生持续的修复，胶原蛋白新生和重排可以持续到3个月至1年。2、招募20例志愿者，进行面部光老化半边脸治疗的对照研究。发现一次治疗后，皮肤肤质明显改善。黑素指数改变与自身对照及与治疗前基础值相比有显著性差异。光老化评分也有显著性变化。因此点阵激光可安全有效应用于中国人光老化皮肤的治疗。3、招募7位志愿者，于后背进行点阵激光治疗，在不同时间点病理取材。发现点阵激光能立即启动创伤修复机制，术后4小时即能检出HSP70的高表达，可持续到术后3个月左右。HSP47在术后1个月达到高峰。微小热损伤区周围立刻出现炎性细胞浸润，即使术后1个月真皮的塑形已完全恢复，炎性细胞的表达仍较周围显著。胶原蛋白和弹力纤维在术后1个月明显增加，3个月继续上升，6个月，1年仍较治疗前显著增高。4、招募20名志愿者，对其点阵激光术后进行半边脸果酸治疗。发现果酸可以减少点阵激光术后的PIH。5、激光辅助药物经皮吸收的实验，说明点阵Er:YAG激光辅助外用麻醉药物的经皮吸收有效。6、以上阶段性研究成果曾三次在国内外大会上进行交流。7、招募20例志愿者，在双侧前臂根据激光的能量密度、点阵的密度不同进行不同组合治疗，在不同时间点进行无创性皮肤检测和病理取材，并进行免疫组化染色和实时荧光定量RT-PCR检测观察真皮MMPs家族、TIMP1、TGF-β的表达。HE染色发现，密度固定时，随着能量密度的增加，激光穿透皮肤的深度也逐渐增加；能量固定时，随着密度增加穿透深度无明显变化。Fontana染色发现术后6天存在PIH、结痂，术后1个月基本恢复正常，术后3个月黑色素较术前表达显著减少。实时定量RT-PCR发现MMPs家族、TIMP1在治疗后的表达显著性上调，在不同时间的数值有统计学差异，不同区域的数值之间有统计学差异，分区与时间之间有明显的相互作用。