藁本内酯调控缺血性脑卒中神经炎性的分子机制

神经炎性是缺血性脑卒中的主要病理机制，其中TLR4-MAPK/NF-kB信号通路的过度激活起着十分重要的作用，寻求调节该致病信号通路的方法和途径成为近年来缺血性脑卒中治疗研究领域新的重要策略之一。藁本内酯(LIG)是当归、川芎等常用中药的主要苯酞类化合物和相关药材及其制剂质控的指标成分。申请者研究发现：对缺血性脑卒中神经炎症反应的强效抑制作用是LIG神经保护作用的重要药理学基础，其抗炎作用机制可能与干预TLR4介导的信号通路有关但分子机制缺乏深入研究；迄今亦未见其它苯酞类抗炎作用机制的相关研究报道。因此本项目拟进一步研究LIG对TLR4-MAPK/NF-kB信号通路介导的缺血性脑卒中神经炎性及脑损伤的调控作用及其分子机制。本项目的实施将促进我国传统重要中药主要有效组分-苯酞类化合物相关的新药或先导化合物研究领域的原创性科研工作的发展，具有重要的科学意义。

神经炎性（Neuroinflammation）介导的大脑神经元细胞死亡是缺血性脑卒中的主要病理机制，临床前与临床证据显示：干预Toll样受体4（TLR4）调控的神经免疫炎性反应可能是有效的治疗新策略。川产道地药材川芎的主要苯酞类成分藁本内酯对脑卒中具有实验治疗作用，本课题通过多种体外细胞和体内啮齿动物模型研究藁本内酯对神经炎性反应的调控及机制。在TLR4天然配体细菌脂多糖（LPS）激活的原代培养大鼠小胶质细胞和人THP-1分化的巨噬细胞模型中，藁本内酯对TLR4/MAPK/NF-κB信号通路具有浓度依赖性的抑制作用，可显著抑制细胞因子和趋化因子的表达，以及炎症相关酶的表达与活性及其产物的生成；同时，藁本内酯对TNF-α、LPS/小胶质细胞条件培养液、缺氧/复氧、低钾分别诱导的原代培养大鼠神经元细胞损伤具有直接的保护作用。在大鼠脑内定位注射LPS和大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注的急性神经炎症模型中，藁本内酯可剂量依赖性下调TLR4及其内源性配体表达、抑制MAPK/NF-κB信号通路、降低炎性因子及炎症相关酶表达，改善胶质细胞激活、神经元细胞损伤及神经行为功能，减少缺血区脑梗体积；此外，藁本内酯可剂量依赖性改善慢性神经炎症及炎症抑制因子Klotho表达。本研究为藁本内酯及相关苯酞类化学物的进一步合理开发利用提供了科学依据。在该基金项目的资助下，课题组已发表论文4篇，其中SCI最高影响因子6.166；受邀参加The Nature Publishing Group主办的雅典国际药学会议作会议发言；培养研究生5名，其中已毕业3名。