活血化痰通络法对自发性2型DPN大鼠炎症JNK/SAPK通路的调控作用及机制研究

Inflammatory response around the disease of Diabetic peripheral neuropathy（DPN） plays an important role in the occurrence. JNK/SAPK signal pathway is closely related to DPN, A number of factors can activate this pathway,change the structure and function of Nerve cells. Research Group found Tongluotangtai could improve Glucose and Lipid metabolism, reduce the blood serum related inflammation factor , improve nerve symptom and nerve conduction speed of the patients or animal models in the pre-clinical and experimental. We surmise that Tongluotangtai may through regulate JNK pathway work .So , through in body and cell raise method, We study whether Tongluotangtai can effect the JNK signal pathway of the spontaneous type 2 DPN rat, and observe its effects on Schwann cells ,study the nature of modern science of the reatment from a new angle.

炎症反应在糖尿病周围神经病变(DPN)发生中起着重要作用。JNK/SAPK通路与DPN的发生密切相关，多种因素（如炎症因子等）可激活此通路，使神经细胞功能和结构发生可塑性改变，导致DPN的发生。课题组前期临床和实验发现具活血化痰通络的药物通络糖泰可改善DPN患者和动物模型糖脂代谢，降低血清相关炎症因子及改善神经症状或神经传导速度。我们推测通络糖泰可能通过调控JNK通路起作用，下调JNK的表达，抑制JNK信号通路，减轻大鼠背根神经节神经细胞缺氧高糖损伤及糖尿病大鼠周围神经病变。因此，通过在体和细胞培养的方法，运用神经电生理、p-JNK免疫组织化学、RT-PCR等手段，研究通络糖泰是否对自发性2型DPN大鼠在体、离体神经组织的JNK信号转导通路有影响，确定其作用此通路的可能靶点，并观察其对雪旺细胞的可能影响，从全新的角度阐释该治法治疗DPN的疗效机制，为中医药治疗DPN开辟新的思路和方法。

本研究基于活血化痰通络法在临床中具有防治糖尿病周围神经病变的确切疗效，通过在体和离体实验，应用神经电生理、组织学及分子生物学等技术探索活血化痰通络法调控神经组织JNK信号通路、改善糖尿病周围神经病变的分子机制。通过分析不同干预方式对糖尿病周围神经病变模型大鼠的影响，发现通络糖泰能够明显缓解糖尿病周围神经病变模型大鼠多饮、多食、高血糖等一般状态，改善低度炎症及氧化应激状态，有效提高模型大鼠神经传导速度。通过在体和离体实验发现，活血化痰通络法延缓糖尿病周围神经病变发生发展的机制，与其激活PI3K/AKT信号通路相关。通络糖泰可能通过改善炎症和氧化应激反应下调JNK通路，抑制DPN大鼠坐骨神经JNKcaspase-3的表达，升高IGF-1mRNA表达，调控Bax、Bcl-2、Bcl-xL等凋亡因子，上调P0、MAG、Krox-20等髓鞘调控基因，从而减少雪旺细胞凋亡，促进雪旺细胞增殖及成髓化，改善坐骨神经病理形态，从而延缓DPN的发展。本研究在探索中医药防治糖尿病周围神经病变作用机制的基础上，构建了糖尿病“代谢记忆”伏邪致病的理论，确立了“正气亏虚，痰瘀内伏”的病机概要，并提出了中医药防治“代谢记忆”的思路与方法：顾护正气，令邪无所生；通利血脉，令邪无所伏。