毛细管电泳免疫高灵敏电化学发光检测新技术和新方法及在生化分析中应用研究

本课题拟充分发挥毛细管电泳高分离效率、免疫分析高选择性和电化学发光检测高灵敏度的特色，构建毛细管电泳免疫高灵敏电化学发光检测联用新技术和新方法，并开展对肿瘤标志物和激素等生物活性分子的灵敏检测及应用研究。主要内容包括：（1）针对不同的研究对象，开展电化学发光试剂直接标记和电活性物质标记生物活性分子及免疫模式研究；探索不同CE分离模式下的免疫电化学发光检测的兼容性和匹配性，也同时开展毛细管电泳免疫电化学发光检测的接口改进或设计工作；（2）开展增强检测灵敏度等样品富集技术研究，提高检测灵敏度；（3）将提出的新方法应用于血浆或血清等实际样品的生化分离分析，并期望应用于1～2种重大疾病（如肝癌、乳腺癌）的早期诊断和预后监测研究等。提供一种经济简便、高灵敏度和高选择性分析生物活性分子的新技术和新方法。

利用合成的纳米材料作为标记物，选择人免疫球蛋白G和人类风湿因子等作为目标抗原，结合非竞争性免疫反应，提出了毛细管电泳免疫高灵敏化学发光检测疾病标志物的新方法。这些新方法已被成功应用于相关病人血清中IgG和人类风湿因子的定量检测及疾病早期诊断。研究成果发表在Analytical Chemistry等期刊上。.提出了一种毛细管电泳分离电化学发光灵敏检测（CE-ECL）阿替洛尔、艾司洛尔和比索洛尔的新方法。聚乙烯比咯烷酮作为添加剂有效改善了分离度，应用场放大进样则显著地提高了三种β-受体阻断剂的检测灵敏度，三种分析物的检出限在10-9 mol/L量级。此外，利用新方法还研究了人血清白蛋白和艾司洛尔的相互作用；建立了一种CE-ECL离子液体灵敏检测阿奇霉素、替米考星、乙酰螺旋霉素和罗红霉素新方法。所提出的方法成功应用于人尿样、药片、鸡蛋及猪饲料中分析物的分离和检测；利用混合胶束构建了CE-ECL同时检测四种局部麻醉药普鲁卡因、利多卡因、罗哌卡因和布比卡因的新方法，并成功应用于人体液尿样和血清中的四种局部麻醉药的分离分析；利用离子液体BMIMBF4，建立了一种CE-ECL内标法同时灵敏检测盐酸麻黄碱、盐酸甲基麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的新方法，将提出的方法成功应用于传统中药及人尿样中三种麻黄碱的定性定量分析，并开展了人体内尿样药代动力学研究。.基于TiO2-石墨烯纳米复合物、壳聚糖和金纳米构建了新型的甲胎蛋白电化学免疫传感器，建立了甲胎蛋白检测的新方法，并应用于肝癌病人血清中甲胎蛋白的测定。基于TiO2-石墨烯/硫瑾/金纳米纳米复合物构建癌胚抗原电化学免疫传感器，并应用于病人血清中癌胚抗原的测定；将石墨烯和铜纳米复合物修饰玻碳电极，然后将葡萄糖氧化酶固定到修饰电极表面构建了新型的电化学生物传感器，建立了葡萄糖检测的新方法等。.此外，还开展了流动注射和化学发光联用技术领域研究，提出了测定人血红蛋白、人血清白蛋白和阿奇霉素等药物的新方法，开展了实际样品的检测应用研究。.本项目资助共发表学术论文24篇，其中SCI 论文19篇。