肝脏微环境改变抑制结直肠癌肝转移的初步研究

基于HBV感染患者结直肠癌肝转移发生率低的临床现象和课题负责人对枯否细胞（KC）的前期研究，本课题以HBV感染转基因小鼠模型为基础，分离纯化KC并收集条件培养基，然后经脾(或直肠黏膜)注射BALB/c鼠结肠癌细胞株CT26（与KC共培养）复制HBV感染结直肠癌肝转移模型。采用生长生存观察、免疫组化、体外共培养、细胞功能测定、流式细胞术和体外培养与在体实验相结合等技术，建立从活体、组织和细胞水平的检测体系，分组对比探讨枯否细胞对癌细胞的作用及其可能机制。进一步利用层析法和凝胶过滤分离纯化蛋白，应用蛋白质芯片－飞行时间质谱技术检测各组枯否细胞蛋白表达差异和分泌功能差异，比较分析已知细胞因子的变化并筛查鉴定新的功能蛋白。本项目结合体内体外实验，从肝脏微环境的角度出发，探讨HBV感染时KC与细胞外基质协同抑制结直肠癌肝转移的机制，为肿瘤转移的基础研究和临床防治提供新模式和治疗策略。