天然免疫分子SP-D在脓毒症急性肾损伤中的作用及分子机制

Septic acute kidney injury (AKI) is an important factor in progression and prognosis in severe patients, but its pathogenesis and effective interventions is still unclear. Previous study found that innate immunity play an important role in septic AKI. Our previous study found that kidney expression of surfactant protein D (SP-D),one important innate immune molecule. And SP-D may function to modulate inflammation in renal tubular epithelial cells induced by lipopolysaccharide(LPS). However,its role in septic AKI is still unclear. This project aims to culture Escherichia coli and evaluate the function of SP-D on the growth agglutination and clear of bacteria. Study SP-D and the its polymorphism in kidney structure, function and form neutrophil extracellular traps by establish septic AKI mouse model. Evaluate the influence of SP-D and its polymorphisms on inflammatory regulation of renal tubular epithelial cells in sepsis by cultured murine renal tubular epithelial cells. This subject will reveal the the molecular mechanisms of innate immunity molecules SP-D in septic AKI, and provide the information to seek prevention septic AKI.

脓毒症急性肾损伤（AKI）是影响重症患者预后的重要因素，但其致病机理尚不完全明确。近年研究发现天然免疫分子在脓毒症AKI中发挥重要作用。申请人先前研究发现肾脏表达天然免疫分子表面活性蛋白D（SP-D），SP-D参与脂多糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子调控。SP-D还可调节中性粒细胞的胞外诱捕网（NETs），但其在脓毒症AKI的作用尚不清楚。本项目旨在通过培养大肠杆菌, 评价SP-D对细菌生长、清除中的作用；建立脓毒症AKI小鼠模型，评价SP-D缺失及其多态性对脓毒症AKI时肾脏结构、功能的影响及其在形成NETs中的作用；通过培养小鼠肾小管上皮细胞，改变SP-D表达及加入不同基因型SP-D，评价SP-D及其多态性对脓毒症时肾小管上皮细胞炎症调节的影响。本研究将以SP-D这个新视点，从分子、细胞、组织及动物整体水平揭示脓毒症AKI时天然免疫能力的作用及其分子机制，为防治脓毒症AKI提供新的思路。

表面活性蛋白 D(SP-D)属于凝集素家族成员，在调节肺天然免疫中发挥重要作用，但其在肾脏天然免疫中所发挥的作用尚不清楚。本项目旨在研究SP-D在肾脏天然免疫中的作用及其可能机制。本项目还探讨了同属于凝集素家族成员的表面活性蛋白 A（SP-A）在肾脏天然免疫中的作用。本研究发现，采用SP-A/D 基因敲除小鼠构建脓毒症急性肾损伤动物模型,其肾功能损伤较野生型加重，肾脏病理改变更重；SP-A及SP-D还参与了肾脏血管通透性及细胞完整性的调节,且SP-A及SP-D 的缺失加重了脓毒症急性肾损伤模型肾脏细胞凋亡。研究还发现，在未行尿路感染模型之前，SP-A/D 基因敲除小鼠肾脏p38磷酸化水平较WT小鼠显著增高，提示SP-A及SP-D可能参与了p38磷酸化信号通路。采用SP-A/D 基因敲除小鼠构建逆行尿路感染动物模型后，SP-A/D 基因敲除组较野生型组肾脏病理改变更重，其肾脏及尿液中中性粒细胞浸润及细菌定量也较多。体外实验还发现，SP-A及SP-D对致尿路感染大肠杆菌生长具有抑制作用。我们的研究还发现维持性血液透析患者血清SP-D水平与动脉粥样硬化标记物——颈动脉内膜中层厚度与冠状动脉钙化呈正相关。本研究表明 SP-D及SP-A在肾脏天然免疫中发挥重要作用。