OX40/PKC/NF-κB途径在多发性肌炎发病中的作用及机制研究

Polymyositis is a CD8+ T cell-mediated serious autoimmune disease. It could be persistent to several years. Nowadays, we know the costimulatory molecules play an very important role in PM, but which is the key is remains unclear. Researches abroad have found that OX40 induced PKC-mediated NF-κB activation plays an important role in the proliferation and maintenance of survival of T cell. We have found that there are increasing of OX40+CD8+ T cell in PM, OX40L are strong positive. We believe that the OX40/PKC/NF-κB pathway plays an very important role in the proliferation and maintenance of survival of CD8+ T cell in PM. To expound the role of OX40/PKC/NF-κB pathway in the proliferation and maintenance of survival of CD8+ T cell in PM, this research will develop T cells and related signal transduction molecules of PM, T cell function in vitro and animal experiments. Establish the theoretical foundation for the new diagnostic markers and new therapeutic strategies of PM in the future.

多发性肌炎（polymyositis,PM）是一种以CD8+T细胞介导的严重自身免疫病，病程可迁延至数年。目前已经明确协同刺激分子在PM发病中起重要作用，但关键分子及机制尚不清楚。国外研究发现OX40通过PKC介导的NF-κB激活在T细胞增殖及维持存活中起重要作用；我们前期研究发现在PM患者中有OX40+CD8+T细胞增多，肌细胞上OX40L强阳性表达；因此推测PM中OX40/PKC/NF-κB途径对CD8+T细胞的增殖、存活及对肌细胞毒性作用起重要调节作用。本项目通过对T细胞功能测定、PM患者肌组织协同刺激信号转导相关分子的检测、PM小鼠模型的各项功能研究以及抗体阻断干预实验，从细胞、组织、动物水平来研究PM中OX40/PKC/NF-κB途径对CD8+T细胞维持肌细胞毒性的调节作用及其机制，为将来PM的新诊断标记及新治疗策略打下理论基础。

多发性肌炎（polymyositis, PM）是一种以CD8+T细胞介导的严重自身免疫病，病程可迁延至数年。目前已经明确协同刺激分子在PM发病中起重要作用，但关键分子及机制尚不清楚。国外研究发现OX40通过PKC介导的NF-κB激活在T 细胞增殖及维持存活中起重要作用；我们前期研究发现在PM患者中有OX40+CD8+T 细胞增多，肌细胞上OX40L强阳性表达；因此推测PM中OX40/PKC/NF-κB途径对CD8+T 细胞的增殖、存活及对肌细胞毒性作用起重要调节作用。.本项目首先通过对PM组及健康对照肌组织免疫组化实验及血液样本流式细胞术分析，证实多发性肌炎患者肌组织及外周血中T细胞上存在OX40/TRAF2/PKC/NF-κB轴重要分子表达、相关协同刺激分子CD4、CD8、CD19、CD20、CD68表达以及外周血相关细胞因子IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-、INF-等的表达情况，证实其在多发性肌炎中对CD8+T 细胞起到一定的作用，并证实PM组与正常对照组存在明显差异。.其次模拟PM 因素体外刺激T细胞后，研究分析T细胞的体外生物学效应。证实T细胞上协同刺激分子及细胞因子的分泌不同，OX40的表达较对照增加。.然后成功制备小鼠模型所需重组人快速型肌球蛋白结合蛋白C（MYBPC2）。采用MYBPC2免疫小鼠获得自身免疫性肌炎模型，成功为后期实验提供自身免疫性肌炎的经济、高效且安全的新型动物模型。.最后研究PM小鼠模型表现，证实多发性肌炎小鼠模型肌组织及外周血中T细胞上OX40/TRAF2/PKC/NF-κB轴分子及相关分子、相关细胞因子在多发性肌炎中起重要作用。.本项目通过对PM患者肌组织协同刺激信号转导相关分子的检测、T细胞功能测定、PM小鼠模型的各项功能研究，从组织、细胞、动物水平来研究PM中OX40/PKC/NF-κB途径对CD8+T细胞维持肌细胞毒性的调节作用及其机制，为将来PM的新诊断标记及新治疗策略打下理论基础。