S1P介导骨髓间充质干细胞参与肝纤维化的机制研究

肝纤维化的特征是以胶原为主的细胞外基质在肝内过多沉积，而肝脏肌成纤维细胞（hMF）是合成分泌这些细胞外基质的主要细胞。hMF的异源性的观点已被学者普遍接受。文献报道和我们的研究工作证实在肝纤维化发生过程中骨髓间充质干细胞（MSCs）是hMF的重要来源，且磷酸鞘胺醇（S1P）可促进MSCs迁移至受损肝脏、参与肝纤维化。本课题拟以MSCs为研究对象，以 S1P 及其受体为靶分子，应用MSCs被绿色荧光蛋白标记的嵌合体小鼠（in vivo）和体外培养的人、小鼠的MSCs（in vitro），采用RNAi 技术或受体阻断剂技术，系统、完整地研究介导 S1P 促进MSCs迁移的受体及受体后信号转导途径。为寻找治疗肝纤维化的药物新靶点提供理论依据。预期在S1P受体阻断剂中可筛选出治疗机制明确、治疗效果明显的抗肝纤维化新药。比对小鼠和人的MSCs对S1P反应的差异，为下一阶段临床方面的应用研究提供依据。

肝纤维化的特征是以胶原为主的细胞外基质在肝内过多沉积，而肝脏肌成纤维细胞是合成分泌这些细胞外基质的主要细胞。肝脏肌成纤维细胞的异源性的观点已被学者普遍接受。文献报道和我们的研究工作证实在肝纤维化发生过程中骨髓间充质干细胞是肝脏肌成纤维细胞的重要来源，且磷酸鞘胺醇（S1P）可促进骨髓间充质干细胞迁移至受损肝脏、参与肝纤维化。本课题以骨髓间充质干细胞、肝脏肌成纤维细胞为研究对象，以 S1P 、鞘胺醇激酶（S1P合成的限速酶，SphK1）、以及S1P受体为靶分子，应用骨髓间充质干细胞被绿色荧光蛋白标记的嵌合体小鼠、RNAi 技术或受体阻断剂技术等，系统、完整地研究了介导 S1P 促进骨髓间充质干细胞迁移、分化的受体及受体后信号转导途径。研究结果表明：骨髓间充质干细胞向损伤肝脏的迁移由S1P受体3介导；骨髓间充质干细胞向肝脏肌成纤维细胞的分化需要SphK1的参与，且由S1P受体1和受体3介导；原代培养的人肝脏肌成纤维细胞及人肝脏星状细胞系LX-2的迁移及活化同样由S1P受体1和受体3介导。如上的研究结果提示：SphK1的抑制剂、S1P受体1和受体3的阻断剂有望开发成抗肝纤维化新药。本项目按计划完成。