Dax1不同剪接体在肺鳞癌中表达的临床意义及功能研究

To date there are no effective targeted therapies for LSCC patient. The therapeutic focus is on the oncogenic drivers of LSCC.Our previous works have shown that Dax1is closely associated with LSCC development, and may be a novel oncogenic driver. The alternative splicing variants of Dax1 (Dax1F and Dax1 A)express heterogeneously and may play different roles in LSCC. In this project, we first analysis the expression profile of Dax1F or A and its clinical significance in LSCC patients. Then, we assess the roles of Dax1F and A in vivo and in vitro by analyzing phenotypes in stable knockout and overexpression LSCC cell lines. To explore the molecular mechanisms, we then establish the networks between Dax1 F/A and signaling pathways by genomics and gene function identification. This studies would expand our knowledge of the mechanisms underlying tumorigenesis and development in LSCC, and launch a generation of specific clinical diagnosis and targeted drugs.

肺鳞癌目前尚无有针对性的治疗方法，对肺鳞癌中关键驱动基因功能的研究是临床诊疗及靶向药物开发的基础。我们在前期的研究中发现，Dax1与肺鳞癌发生发展密切相关，该分子的两种剪接亚型Dax1F和Dax1A在肺鳞癌中均表达但可能涉及不同细胞功能。基于以上发现，本研究拟首先通过临床大样本分析明确Dax1两种剪接体在肺鳞癌中的表达与肿瘤分期/级、转移及预后的相关性；随后在肺鳞癌细胞中分别建立Dax1F/A的敲除及过表达模型，通过体内/外细胞功能实验，阐明两种剪接体在肺鳞癌中的具体功能；最后结合对信号通路及基因转录组的分析，初步探讨其相关调控机制。本研究不仅有助于进一步了解肺鳞癌发展机理，还可为肺鳞癌的特异性诊断及药物靶点的发现提供新的线索。

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）是发病率最高的肿瘤之一，目前对于影响其发生发展关键基因的了解还十分有限。本项目主要研究Dax1的两种剪接体在NSCLC中的表达的临床意义和功能，并对其调控机制进行初步分析。我们的研究发现：a.对大量NSCLC临床样本的分析表明，Dax1F和Dax1A在NSCLC中高表达并与肿瘤体积及转移正相关；b.在不同NSCLC细胞系中的敲除Dax1后，细胞增殖、抗凋亡能力均降低，成瘤性也显著减弱，且过表达Dax1F和Dax1A剪接体均可诱导正常细胞的致瘤性转化；c. 在NSCLC中，Dax1F主要影响Rho信号通路传导，而Dax1A则主要调节HIF-1信号活化。本研究不仅有助于我们明确该分子在非小细胞肺癌中的功能，更可为深入分析肺癌发生发展机理，发现特异性的肿瘤诊疗靶点提供基础。此外，在项目实施中我们还取得以下进展：1、Bcl2是重要的抗凋亡分子。我们发现在ESCs中存在2个Bcl2的可变剪切体。在无血清培养条件下，两者均能促进ESCs存活及生长，但只有Bcl2α过表达有利于维持ESCs长期扩增及多能性（上述研究已作为论著在Biochemical and Biophysical Research Communications杂志发表）；2、ABHD11作为重要的脂代谢调控基因，可通过稳定ESC中的脂代谢状态，参与多能性维持（上述研究已作为论著在Frontiers Cell and Developmental Biology杂志发表）。鉴于ESC与肿瘤细胞的相似性，以上研究也可为肿瘤发生驱动基因的探索提供线索。