重组人中期因子修复关节软骨损伤的药效学研究

在组织再生生物新药的筛查过程中，我们发现重组人中期因子（rhMK）能显著促进大鼠膝关节软骨组织损伤区域的修复，并通过体内外实验发现该修复作用是由rhMK刺激软骨细胞增殖所致。在此研究基础上，本课题建立更能模拟临床骨关节炎形成的DMM（destabilization of the medial meniscuss）诱导的骨关节炎模型，通过体内外实验研究rhMK在骨关节炎模型中对关节软骨基质损伤的修复作用及抑制软骨基质降解的作用机制，期望能消除或改善骨关节炎的疼痛症状，提高小鼠的活动能力。同时进行初步的毒理实验，为评价rhMK临床使用剂量的安全性提供依据。本课题的成功实施，可为将rhMK开发成治疗骨关节炎的新药提供实验基础，从而彻底颠覆骨关节炎的传统治疗理念，将过去的"对症治疗"转变为"对因治疗"，提高病人的治愈率，改善病人的生活质量，为广大骨关节炎患者带来彻底治愈的希望。

本研究建立了更能模拟临床骨关节炎形成的DMM（destabilization of the medial meniscuss）诱导的骨关节炎模型，通过体内外实验研究rhMK在骨关节炎模型中对关节软骨基质损伤的修复作用及抑制软骨基质降解的作用机制。 体内实验结果证明rhMk能够降低DMM导致的OA活动能力的影响，减轻DMM骨关节炎模型疼痛的影响。体外进行了人OA疾病软骨细胞分离、单层培养和3D培养，并以此为基础研究了rhMK对软骨细胞增殖和分化的影响，首次证明了rhMK可以促进人OA软骨细胞增殖、抑制体外培养软骨细胞去分化。在OA病人软骨细胞体外培养基础上，研究了rhMK促进细胞增殖的分子机理，阐明了rhMK通过膜受体激活Erk1/2和Akt信号通路，调控细胞周期因子，进而促进细胞增殖的分子机制。同时，我们对纯化的rhMK毒性进行了初步评估，连续给药后，短期内检测小鼠的内脏个组织器官，无异常增殖，体内外结果显示rhMK在治疗剂量下无致癌性。本研究在前期工作的基础上进一步丰富了rhMK治疗骨关节炎临床前研究成果，为推进rhMK临床研究奠定了基础。