SIRT1调控子宫内膜癌孕激素受体信号通路的机制研究

代谢异常与Ⅰ型子宫内膜癌高发生率和孕激素高耐药率有关。孕激素受体PR缺失是导致孕激素治疗失败的主要原因,如何上调PR表达是提高内膜癌保守治疗成功率的关键。我课题组在子宫内膜癌孕激素耐药的研究中发现，SRIT1激活剂二甲双胍和白藜芦醇与孕激素联用对子宫内膜癌有较好治疗效果，并可上调PR表达，提示NAD+依赖的Ⅲ类去乙酰化酶SlRT1可能参与调控子宫内膜癌PR信号通路。本研究通过临床研究、体外和动物试验，利用siRNA、质粒转染、染色质免疫共沉淀、荧光素酶报告基因等方法研究SIRT1是否是调控内膜癌PR信号通路的关键基因以及SIRT1在调控PR转录活性中的作用；探究子宫内膜癌中是否存在"AMPK－SIRT1－PR－孕激素治疗" 网络。通过深入解析SIRT1子宫内膜癌调控PR信号通路的具体机制，，为SIRT1激活剂在临床上运用于治疗子宫内膜癌提供理论基础。

本课题通过收集2011年7月至2012年7月就诊且经诊断性刮宫病理证实为子宫内膜增生性病变和子宫内膜癌的病例233例，以正常生育期健康女性38例为正常对照做组织芯片，并收集患者一般资料、血脂、血糖与胰岛素等资料，检测SIRT1、PR、ER表达水平及与代谢指标的单因素和回归等相关分析；敲除或过表达子宫内膜癌细胞SIRT1或调控SIRT1活性后，测试PR表达和孕激素信号通路活性影响及治疗效果比较；构建PR转录激活的报告基因分析平台，通过双荧光素酶检测方法测定调控SIRT1对PR信号通路的调控；子宫内膜增生性病变小鼠模型等方法探讨SIRT1调控子宫内膜癌PR信号通路的具体机制。 研究发现，子宫内膜增生性病变及内膜癌患者广泛存在代谢异常，从正常子宫内膜组织、癌前病变、癌变子宫内膜中SIRT1和PR同步下降。反复高糖刺激可导致内膜癌细胞SIRT1和PR表达下降，促进细胞增殖和侵袭。SIRT1激活剂 Resveratrol处理子宫内膜癌细胞后，可抑制子宫内膜癌增殖。质粒过表达SIRT1或RNA干扰抑制SIRT1 表达可增强或抑制PR转录活性，前者可抑制子宫内膜癌细胞增殖。抑制PR阳性内膜癌细胞的SIRT1表达可下调PR对其反应元件的激活活性。激活PR阴性内膜癌细胞的SIRT1表达可上调PR对其反应元件的激活活性。以上提示子宫内膜癌患者胰岛素抵抗导致的反复高糖高胰岛素刺激，导致SIRT1丢失，PR表达下降，可能是子宫内膜癌变发生的关键因素。SIRT1对PR信号转导通路具有反馈增强效应，为SIRT1激活剂在临床上运用于治疗子宫内膜癌提供理论基础。