TGF-β1对脑梗死溶栓后出血转换的干预作用

出血转换（HT）是rt-PA溶栓治疗脑梗死的严重并发症，大大限制了rt-PA的临床应用。研究表明，血脑屏障中基底膜的破坏是rt-PA诱导HT的重要原因。因此，维持基底膜的完整性便能减少溶栓后HT发生的风险。转化生长因子β1（TGF-β1）是一种重要的促细胞外基质沉积的因子，它能够上调t-PA生理性抑制剂- - 纤溶酶原激活物抑制剂-1的表达，促进细胞外基质组分合成，从而发挥维持基底膜完整性的作用。因此，我们推测，应用TGF-β1能够阻止rt-PA溶栓对基底膜的破坏，减少HT的发生。本研究将建立大鼠血栓栓塞性大脑中动脉阻塞模型，在rt-PA溶栓的同时给予TGF-β1，评估TGF-β1对HT的预防作用，并考察基底膜的完整性及其主要成分的表达情况；同时，我们将对影响基底膜的有关因素进行分析，阐述TGF-β1干预溶栓后HT的作用机制。本研究旨在为rt-PA更安全的临床应用提供解决方法。

本研究建立血栓栓塞性大鼠大脑中动脉阻塞模型，予以重组组织型纤溶酶原激活剂（rt-PA）溶栓，观察转化生长因子β1（TGF-β1）对溶栓后出血转换的干预作用。将大鼠分为假手术组、对照组（单纯模型组）、rt-PA组（术后3 h静脉给予rt-PA溶栓），TGF-β1组（溶栓同时给予TGF-β1）。术后24 h处死大鼠，对脑梗死体积、出血评分、脑水肿程度、血脑屏障（BBB）通透性进行评估。采用电镜观察BBB结构，免疫组化法评估BBB基底膜主要成分IV胶原、层粘连蛋白表达情况。检测缺血脑组织rt-PA抑制物——纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）表达，基质金属蛋白酶（MMP）活性及表达，炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）含量。与对照组相比，rt-PA组大鼠出血评分增加，BBB通透性增加；TGF-β1干预可降低出血评分及BBB通透性。观察BBB超微结构显示溶栓后基底膜边缘模糊、连续性受到破坏，免疫组化结果提示rt-PA使得IV胶原、层粘连蛋白表达减少；而给予TGF-β1可维持基底膜完整性，提高IV胶原、层粘连蛋白表达。rt-PA组大鼠缺血脑组织PAI-1表达减少，MMP-2、MMP-9活性增高、表达增多；TGF-β1治疗可提高PAI-1表达，降低MMP-2、MMP-9表达及活性。脑梗死大鼠脑组织中IL-1β、IL-6、IL-10和MCP-1含量升高；rt-PA溶栓大鼠脑组织IL-1β、IL-6、MCP-1含量明显下降；TGF-β1干预后IL-1β、IL-6、MCP-1含量进一步下降。研究表明溶栓同时给予TGF-β1可减轻rt-PA对BBB的破坏作用，从而降低溶栓后出血转换的发生，这为rt-PA更安全的临床应用提供了一条可能途径。