DKK1长肽疫苗免疫治疗多发性骨髓瘤的作用及其机制的实验研究

Dickkopf-1 (DKK1) is shown to play important roles in regulating MM bone disease and MM pathogenesis. Moreover, DKK1 is broadly expressed in myeloma but not expressed in most of the normal tissues, these evidence together make DKK1 an ideal target for immunotherapy on MM. Our previous study clearly show that mouse DKK1-DNA vaccine protects mice from myeloma and is also therapeutic against established myeloma, furthermore our preliminary results demonstrate that human DKK1 long peptide harboring a number of T cell epitopes is able to induce specific expansion of both CD8+T and CD4+T cells. In the current study we intend to investigate potential effects of DKK1 vaccine on stimulating expansion of specific T cells including both CD8+T and CD4+T cells, and its therapeutic effects on myeloma in animal models; to explore putative effects of Lenalidomide and/or B7H1 blocking antibody on enhancing the specific immune response induced by the DKK1 vaccine and on inhibiting expansion of regulatory T cells as well as Th2 type cells. It is undoubtedly that the success of such study on DKK1 vaccine will create solid knowledge for developing further clinical trails of DKK1 vaccine on MM.

Dickkopf-1 (DKK1)在多发性骨髓瘤（MM）骨病发生和MM细胞生长方面起重要作用，DKK1在MM广泛表达，而大多数正常组织不表达，这些特性表明DKK1应是一个理想免疫治疗MM的靶分子。我们前期研究发现鼠源性DKK1 DNA疫苗接种可诱导体内抗骨髓瘤作用(Qian, Blood 2012)。合成肽疫苗工艺较简单，且安全性好。本研究是在我们前期研究的基础上探索含有多个MHC-I和MHC-II限制性T细胞表位的DKK1长肽(DKK1-3-76长肽)疫苗诱导特异性CD8+T和CD4+T细胞应答的作用，及其体内抗骨髓瘤细胞的作用；分别研究来那度胺和B7H1阻断性抗体对DKK1长肽疫苗诱导的特异性免疫反应和抗骨髓瘤细胞作用的协同效应，以及它们体外和体内抑制调节性T细胞和Th2 CD4+T细胞扩增的作用。本研究旨在为DKK1长肽疫苗用于治疗MM的临床研究提供重要的试验依据和理论基础。

Dickkopf-1 (DKK1)是近年来发现的一种与胚胎发生及肿瘤发展密切相关的糖蛋白，经多种途径抑制成骨细胞（osteoblast, OB）和激活破骨细胞(osteoclast, OC)，在多发性骨髓瘤（MM）骨病的发生和MM细胞生长方面起重要作用。DKK1在MM广泛表达，而大多数正常组织不表达，这些特性表明 DKK1 应是一个理想免疫治疗MM的靶分子。我们前期研究发现鼠源性DKK1 DNA疫苗接种可发挥抗骨髓瘤作用（Qian, Blood, 2012）。本课题在前期研究的基础上检测了含有多个MHC-I和MHC-II限制性T细胞表位的DKK1长肽（DKK1-3-76长肽）疫苗诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte, CTL）的效率并检测其对特异靶细胞的杀伤作用。DKK1长肽的体内免疫原性和抗骨髓瘤作用的试验正在计划中。国内外均已有临床试验证明NK细胞治疗MM是有效的，有望成为彻底治愈MM的方法之一。但NK细胞在人的外周血淋巴细胞中只占5%-15%，其临床应用受到限制。故体内外高效扩增NK细胞是临床应用的瓶颈问题之一。为有效的体外扩增NK细胞，我们对已发表的方法学进行优化，发现优化后的NK细胞及其杀伤功能均有显著提高，而来那度胺不能提高NK细胞的杀伤功能，NK联合DKK1疫苗的研究正在计划中。本研究为DKK1长肽疫苗及NK细胞用于治疗MM的临床研究提供了重要的试验依据和理论基础。