运用核磁共振构建靶向兼抗耐药的中药纳米胶束系统

中药抗肿瘤一线药物都存在多药耐药性，是临床一直未解决的问题。本项目提出一种高效靶向抗耐药系统，该给药系统通过肺部吸入主动聚集于肺肿瘤组织及细胞表面，协载体迅速溶解释放出纳米胶束，并利用叶酸的主动靶向性及聚合物Pluronic抑制P-gp蛋白的作用，将药物大量导入肿瘤细胞，显著改善抗肿瘤药物的细胞靶向性及抗耐药能力，增强药效和安全性。本课题组与日本千叶大学和岐阜大学药学院合作，利用核磁共振优化建立了纳米胶束载药系统。本项目将使用固液核磁共振及脉冲梯度场、激光散射、扫描电镜、X-射线衍射、透射电镜等先进手段，探讨（1）药物与载体的分子相容性，筛选出最匹配的Pluronic结构单元；（2）描绘载药系统的三维空间结构，以优化载体透膜性和药物释放性能；（3）总结胶束态和游离态Pluronic与逆转肿瘤耐药之间的内在关系和规律。本项目为中药抗肿瘤药多药耐药这一关键科学问题提出新方法、新思路。

多药耐药现象是肿瘤治疗过程中亟需解决的难题。本课题以P-糖蛋白的抑制剂pluronic为载体，通过选择不同相对分子质量的pluronic、及改变pluronic分子中PEO和PPO 嵌段分子量组合配比，以紫杉醇、姜黄素、小檗碱、石杉碱甲、钩藤碱等为模型药物，构建了一系列在体内稳定且具有长循环的靶向给药系统。以核磁共振技术（NOE效应、弛豫时间、化学位移张量、自扩散系数和偶合常数等）、热分析、X射线衍射及电子显微镜等技术，研究载药胶束的粒子大小、载药系统的组装机制、载体/药物相互作用等与药物溶出行为及稳定性之间的关系。以人肺腺癌A549细胞及其耐药细胞株为对象，在细胞水平上考察各种胶束体系对药物细胞摄取的作用，研究制剂因素对逆转肿瘤细胞多药耐药性的影响，考察载药胶束的肿瘤靶向性并评价其抑制P-糖蛋白的潜力。项目组同时对载药胶束体内外的毒理及药效学进行了系统的研究。结果表明，本项目构建的靶向胶束载药系统能够显著增强细胞内的药物浓度，有利于提高肿瘤治疗效应。为深入进行抗耐药性评价，我们构建了P-糖蛋白过度表达的P-gp-MDCKII细胞，在基金的支持下，课题组首次发现多个中药成分如石杉碱甲和钩藤碱均是P-糖蛋白的良好底物。