MicroRNA-34a调节脑胶质瘤干细胞增殖、自我更新和肿瘤发生的分子机制研究

胶质瘤干细胞在胶质瘤发生、发展和复发中起关键作用。MicroRNA是调节多种癌基因和肿瘤抑制物表达的重要因素之一。本项目组前期工作已证实砷剂通过调节Notch信号通路抑制胶质瘤干细胞增殖、自我更新和肿瘤生成。本实验利用PCR和基因芯片技术，检测MicroRNA-34a和相关癌基因及抑癌基因在胶质瘤细胞及胶质瘤干细胞中的差异表达。利用流式细胞技术分选胶质瘤干细胞，转染MicroRNA-34a至胶质瘤干细胞，检测胶质瘤干细胞中具有差异表达的癌基因和抑癌基因表达变化，同时观察胶质瘤干细胞在增殖、自我更新、细胞周期、凋亡、自噬、肿瘤生成等方面变化，讨论MicroRNA-34a通过调节相关基因调节胶质瘤干细胞的生物学特性，初步探明MicroRNA-34a调节胶质瘤干细胞增殖、自我更新和肿瘤生成的分子机制，为MicroRNA-34a作为胶质瘤预后判定和个体化治疗指标提供研究基础。

miR-34a对胶质瘤干细胞的调节作用及机制目前并不完全清晰，本项目重点是证实miR-34a对胶质瘤干细胞增殖的抑制作用，以及miR-34a通过下调Notch信号通路抑制胶质瘤干细胞增殖的机制。根据项目计划和实验数据我们得出以下结论：1. miR-34a在胶质瘤细胞中的表达情况：无论是在胶质瘤细胞系还是在胶质瘤手术标本中miR-34a的表达都较正常组织细胞明显降低，转染miR-34a入胶质瘤细胞可抑制胶质瘤细胞增殖。2. 同时通过流式细胞技术和免疫染色技术我们检测到Nesting（+）和CD133(+)细胞数明显降低，说明miR-34a的过表达可抑制胶质瘤干细胞的增殖。3. 无论在体内还是在体外转染miR-34a的胶质瘤细胞的肿瘤生成能力都有较明显的降低。4. 我们通过对Notch信号通路的检测发现，miR-34a的转染使Notch1明显降低，从而降低了Notch信号通路对胶质瘤干细胞的保护作用，抑制了胶质瘤干细胞的增殖。我们的数据证实了miR-34a能抑制胶质瘤干细胞的增殖，并初步证实了miR-34a通过下调Notch信号通路抑制胶质瘤干细胞的增殖。本研究进一步完善了microRNA对胶质瘤干细胞的调节作用及机制，为miR-34a作为胶质瘤潜在的治疗途径提供了实验基础。