根据计算机辅助蛋白质结构分析和序列分析,设计了针对t-PA F-E连接区的半衰期延长的突变方案(44-50位HSVPVKS置换为纤维亲和素fibronectin F区的连接区ESKPEAEE);根据设计方案,用定点诱变方法构建了新型t-PA突变体FR,突变体在CHO细胞中成功地获得了稳定性表达;对表达产物所进行的生物学特性分析表明,突变体FR在大白鼠血浆中的清除延缓了10倍以上,而与纤维蛋白的亲和力未受损害。实验结果表明,t-PA分子F-E连接区的氨基酸序列确实对其在血浆中的半衰期具有重要的决定性作用,或者说F-E连接区是t-PA分子半衰期的主要功能区。
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数据更新时间:2023-05-31
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