血吸虫早期童虫调控宿主免疫应答的分子基础及机制研究

血吸虫早期童虫是大多数血吸虫疫苗研究的靶标，但由于对血吸虫感染早期免疫应答及其调控机制缺乏认识，使血吸虫疫苗的发展受到了限制。而研究表明，血吸虫早期童虫排泄分泌物（ES）诱导树突状细胞（DC）的非经典活化，而活化的DC在其血吸虫调控机体免疫应答中起关键作用。本课题通过建立的基于小鼠DC的抗原评价体系，对日本血吸虫早期童虫ES中引起小鼠DC非经典活化的相关组分和分子（群）进行筛选，并对筛选的分子进行免疫学功能研究，并探讨血吸虫早期童虫ES诱导DC非经典活化机制和血吸虫感染早期的免疫调控的分子机制，将为血吸虫疫苗的设计和优化提供重要的科学依据。本研究结果将加深对血吸虫感染诱导的免疫应答特别是免疫调节机制的认识，不仅可以直接应用于血吸虫病防治的研究，而且对其它病原的相关研究也提供新思路。

早期童虫是日本血吸虫感染的最初阶段，但其激活或者调控宿主免疫应答的机制一直不清楚。本课题通过建立的基于小鼠DC的抗原评价体系，对日本血吸虫早期童虫不同时段分泌排泄抗原刺激或抑制小鼠BMDC活化的分子机制进行分析，并对免疫调控相关组分和分子（群）进行筛选和免疫学功能研究。结果发现：（1）日本血吸虫早期童虫0-3小时分泌排泄物抑制BMDC活化，进而抑制T细胞分化。（2）发现日本血吸虫童虫转化后6小时是其分泌排泄物免疫学特性转变重要时间节点。其中 0-6hRP抑制BMDC活化，而6-12hRP刺激BMDC的活化。（3）发现了日本血吸虫早期童虫分泌排泄物0-6hRP抑制TLR配体对BMDC的活化。（4）应用蛋白质二维电泳结合质谱筛选0-6hRP中免疫调控分子，筛选获得差异蛋白分子30余个。（5）对差异蛋白Sj34，Sj33.7，Sj75.1的定向克隆及原核表达，获得重组蛋白rSj34，rSj33.7，rSj75.1。三个重组蛋白刺激BMDC，均诱导其经典活化。这些结果显示，日本血吸虫入侵机体后调控宿主的方式是动态的，寻找关键时间节点，并阐明其变化的分子基础和机制，是解开日本血吸虫早期童虫调控宿主免疫应答的关键。而本研究初步把早期童虫分泌排泄抗原的变化的时间节点确定为转化后6小时，并对其可能的分子机制进行了探讨，为进一步阐明日本血吸虫早期童虫调控宿主免疫应答的分子机制奠定了基础。