Ⅱ型糖尿病的猕猴模型构建及重编程干细胞的效应机制

国内糖尿病的发病率快速上升，建立相应的灵长动物模型和探讨新防治措施至关重要。本项目拟在前期建立卵细胞提取物诱导体细胞重编程和Ⅰ型糖尿病猕猴模型的基础上，进一步探讨Ⅱ型糖尿病的猕猴模型构建与评价方法，用本项目组创建的方法体外诱导模型猴的体细胞重编程并探讨其表观遗传学机制，免疫组化和流式细胞术分析其表型特征，体内外诱导法分析其分化潜能并建立鉴定标准。将转GFP基因和磁标记的重编程干细胞移植入模型猴体内，通过相关生化指标测定，病理组织学结构和超微结构观察，代谢、免疫、内分泌功能分析等观察植入细胞对糖尿病猴的作用。通过重编程细胞的体内示踪、分布、整合和表型等分析，探讨猕猴重编程干细胞移植对Ⅱ型糖尿病的疗效机制。研究结果将为糖尿病研究提供灵长模型，创建一种新型干细胞获取技术，为临床糖尿病的治疗提供新技术方法、新型材料和新理论。

鉴于国内糖尿病的发病率快速上升，为探讨干细胞治疗2型糖尿病的可行性，本项目采用皮下注射链尿咗菌素联合饲喂高脂、高糖、高盐饲料的方法建立了猕猴、树鼩和兔的2型糖尿病、1型糖尿病和代谢综合征模型，利用模型评价了脐带间充质干细胞、诱导性干细胞的疗效和机制。结果：（1）建立了猕猴2型糖尿病和树鼩2型糖尿病、代谢综合症模型构建与评价技术方法和技术体系并获得相应模型；（2）建立了体外诱导人、猴、树鼩皮肤成纤维细胞重编程为多能干细胞样细胞及其鉴定技术方法和规范并获得相应细胞；（3）利用动物模型验证了诱导性干细胞治疗糖尿病的疗效和诱导性干细胞的体内生物学行为，通过相关生化指标测定，病理组织学结构和超微结构观察，代谢、免疫、内分泌功能分析等观察植入细胞对糖尿病猴的作用。（4）建立了转GFP基因、荧光素酶基因、磁标记重编程干细胞的技术方法及移植入模型动物体内后示踪、分布、整合和表型等；通过重编程细胞的体内分析，探讨猕猴重编程干细胞移植对Ⅱ型糖尿病的疗效机制。