免疫抑制剂FTY-720通过阻断S1P信号通路诱导妊娠免疫耐受的实验研究

Successful pregnancy relies on the maintenance of maternal-fetal immune tolerance，and unexplained recurrent spontaneous abortions (URSA) is caused by maternal-fetal interface immune dysfunction,so how to efficiently prevent the occurrence of URSA has been a hot subject in medical field. Recent study showed that the new immunosuppressive agents Fingolimod (FTY720) induced transplantation tolerance via blocking S1P signal transduction pathway，FTY 720 has showed clinical efficacy in phase II/III studies of transplantation tolerance. Fetus carries paternal heritage and antigen is a semi-allograft to maternal immune system, we speculate that FTY720 induce maternal-fetal immune tolerance by reversing the balance disorder of Th1/Th2、Treg/Th17. We take the abortion mouse model as research objects,and observate the influence of FTY720 on the embryo resorption rate and the expression of Th1/Th2、Treg/Th17 after the gene silencing of S1P receptor, to explore the concrete mechanism of FTY720 participating maternal-fetal immune tolerance,and then provide the basis of experiment and theory for deploitating the new way of diagnosis and treatment URSA.

妊娠成功与否有赖于母胎免疫耐受的维持，而原因不明复发性流产（URSA）主要是由于母胎界面免疫耐受失调所致,如何有效防治URSA的发生一直是医学界研究的热点。新近研究表明冬虫夏草衍生物FTY720是一种安全性良好的新型免疫抑制剂，其进入人体后被快速磷酸化成FTY720-P，其竞争性抑制S1P信号通路，从而逆转Th1/Th2、Treg/Th17平衡失调，其在诱导移植免疫耐受方面已进入临床试验，胚胎对于母体来说也是一种半同种移植物，推测FTY-720可能通过逆转Th1/Th2及Treg/Th17平衡失调而诱导妊娠免疫耐受的形成。本课题以自然流产模型孕鼠为研究对象，观察孕鼠S1P受体基因沉默前后，经口灌服FTY-720对孕鼠胚胎丢失率的影响以及外周血和局部组织中Th1/Th2、Treg/Th17的表达情况，探讨FTY-720参与母胎免疫耐受的具体机制，为开拓URSA治疗新途径提供实验和理论依据。

妊娠成功与否有赖于母胎免疫耐受的维持，而原因不明复发性流产（URSA）主要是由于母胎界面免疫耐受失调所致,如何有效防治URSA的发生一直是医学界研究的热点。新近研究表明冬虫夏草衍生物FTY720是一种安全性良好的新型免疫抑制剂，其进入人体后被快速磷酸化成FTY720-P，其竞争性抑制S1P信号通路，从而逆转Th1/Th2、Treg/Th17平衡失调，其在诱导移植免疫耐受方面已进入临床试验，胚胎对于母体来说也是一种半同种移植物，推测FTY-720可能通过逆转Th1/Th2及Treg/Th17平衡失调而诱导妊娠免疫耐受的形成。目前国内外有关FTY720与复发性流产的相关性研究尚未见正式报道，本研究首次观察FTY720对自然流产模型孕鼠的影响。研究结果表明，过继转移FTY720能明显降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率，且其具体机制可能是通过阻断了S1P信号通路而逆转了Th1/Th2、Treg/Th17失平衡状态，最终诱导了妊娠免疫耐受。研究过程中，我们利用了DC细胞这个体内唯一既能刺激机体免疫应答又能维持机体免疫耐受的抗原提呈细胞(APC)作为病毒载体进行S1PR受体的沉默，而进一步的研究发现未成熟DC注入机体后体内生长过程中会促使DC成熟，从而限制了它诱导免疫耐受的形成。近年采用细胞因子和基因修饰等方法在体外构建耐受性DC然后输人体内诱导机体免疫耐受，取得了较好的疗效。研究发现过继转移FTY720-DC在移植免疫耐受领域表现出极大的优势。因此在此基础上我们进一步观察了FTY720-DC对自然流产模型孕鼠的影响。研究结果表明，过继转移FTY720-DC能明显降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率，而过继转移单纯DC或FTY720虽然在一定程度上也能降低胚胎丢失率，但其效果远不及FTY720-DC明显，我们推测DC作为体内唯一既能刺激机体免疫应答又能维持机体免疫耐受的抗原递呈细胞，其介导了FTY720的免疫抑制作用，但其具体机制尚不明确，优化FTY720-DC的共表达，探讨FTY720-DC发挥免疫调节功能的最佳条件将为临床治疗反复自然流产提供新的治疗途径。