免疫细胞干预人胎儿皮肤深Ⅱ°烧伤创面汗腺再生修复的实验研究

汗腺再生和功能康复是目前创伤领域研究的重点和难点。然而，局部过度炎症免疫反应与烧伤创面瘢痕增生和皮肤附件破坏关系密切，但其作用机制不清。为探讨创面汗腺再生修复的细胞免疫因素，在前期工作的基础上，我们首先建立人胎儿皮肤（HFS）裸鼠移植模型及其深Ⅱ度烫伤模型，依次开展HFS移植物免疫反应诱导、正常成人和大面积烧伤患者外周血单核细胞（PBMC）向T效应细胞和树突状细胞（DCs）的分化诱导及其局部免疫干预，通过组织形态学、细胞生物学、分子免疫学、实验动物学和细胞追踪等技术方法，对比研究内源性和外源性免疫细胞（包括T细胞亚群、幼稚DCs、巨噬细胞、Langerhans细胞等）在HFS组织中的分布、密度和表型特征，以及损伤前后汗腺结构、干细胞定位和表型特征改变及其对相关粘附分子和细胞因子等表达的影响，以探讨汗腺结构维持和损伤修复的细胞免疫机制，为汗腺再生医学提供免疫学思路。

促进创面愈合和预防瘢痕增生是目前创（烧）伤领域的研究重点。皮肤附件，特别是汗腺再生和功能修复在该过程中起着重要作用。研究表明，局部过度炎症反应导致烧伤创面皮肤附件破坏和瘢痕增生，但其作用机制尚不清楚。胚胎皮肤创伤在愈合过程中炎症反应缺乏或轻微，皮肤附件能够再生，创面愈合后无明显瘢痕。这种无瘢痕愈合机制为诱导汗腺再生、预防瘢痕增生、促进创面愈合提供了线索。为探讨创面汗腺再生修复的细胞免疫因素，本研究分别将大鼠和人不同时期的胚胎皮肤移植至裸鼠背部，成功制作出胚胎皮肤裸鼠移植模型及其深Ⅱ度烧伤模型；发现胎龄16.5 d左右为大鼠胚胎皮肤移植的最佳妊娠时间，但其发育时间短，不适合干预和长期观察；观察到人早期胚胎皮肤移植后表皮干细胞表面标记物K5和K19动态变化与宫内发育基本一致，早期胚胎皮肤烧伤前后MMP-2和MMP-7表达规律不同于成人；对中晚期胚胎皮肤烧伤创面进行了外周血单个核细胞（PBMCs）干预，数据资料正在进一步整理。人胚胎皮肤裸鼠移植模型及其深Ⅱ度烧伤模型的建立，便于对比研究不同免疫状态下T细胞、DCs的增殖、迁移和分化，及其对汗腺再生修复方式和周围微环境的影响，为汗腺再生修复奠定了良好的基础。