I型鸭肝炎病毒感染性克隆的构建及致病机理的研究

鸭肝炎是由小RNA病毒引起幼龄小鸭的一种重度致死性烈性传染病，该病发病急，传播快，死亡率高，在世界范围内广泛流行，给养鸭业造成重大经济损失。本项目拟在广泛采集病料、分离病毒并鉴定的基础上，通过流行病学调查，摸清我国I型鸭肝炎病毒的流行规律，筛选具有代表性的、国内流行的强、弱毒株进行全基因组序列测定，采取反向遗传操作技术，构建出强、弱毒株的感染性克隆。再采用生物信息学分析方法，将强毒株和弱毒株的核酸序列进行比对，借助GenBank提供的资料，推测出DHV-1毒株致弱的关键性位点和区域，通过改造和替换，构建系列感染性克隆突变株。利用体外建立的鸡胚成纤维传代细胞感染体系，比较不同的感染性克隆定向突变株在细胞中的感染状态，结合核苷酸序列一级结构特点，进行致病相关位点的定位，从而明确DHV-1的分子致病机理，为研制DHV-1弱毒疫苗提供技术平台，也为鸭肝炎病毒基础研究提供理论依据。