基于近红外光谱和多维谱效研究续断"发汗"前后成分变化及对药效的影响

"Sweating" was the traditional primary processing method of Radix Dipsaci crude drug, however, the method has been almost abandoned by most herbal farmers, which has a serious impact on the quality of medicine and TCM clinical curative effect. At present, there has been no systematic study on the mechanism of the primary processing "sweating"of Radix Dipsaci. In the study, we would establish a rapid identification method for Radix Dipsaci sweating or not by near infrared spectrum, and study systemally the changes of components in Radix Dipsaci sweated in vivo and vitro, and the influence of effiacy (Osteoblast Proliferation and Diffentiation), using HPLC, HPLC/MS analysis technology and serum pharmacology, and then analyze the correlation between the changes of chemical composition and the changes of efficacy, applying the methods of multi-dimensional profile-effect and chemometrics, to explain the mechanism of the primary processing "sweating"of Radix Dipsaci. Meanwhile, to provide a new thought and method for studying the mechanism of the primary processing "sweating" of other chinese medicinal materials, and scientific basis for formulating the standard of primary processing technology of herb medicine and SOP.

"发汗"是续断药材传统的产地加工方法，然而目前产地加工大都摒弃此法，严重影响了药材质量和中医药临床疗效。目前，尚没有系统开展续断产地加工"发汗"机理的研究。本项目拟采用近红外光谱建立一种续断 "发汗"与否的快速鉴别方法，同时采用HPLC、HPLC/MS等先进分析技术，以及含药血清药理，系统研究续断经产地加工"发汗"后的体内外物质基础及其对主要功效"续折伤"（考察成骨细胞增殖、分化）的影响；并采用多维谱效关系及化学计量手段，分析"发汗"前后成分变化与功效变化的相关性，进而阐明续断 "发汗"的机理，同时为中药产地加工"发汗"机理的研究提供一种新的思路与方法，为制定规范合理的药材初加工技术标准及其SOP 提供科学依据。

“发汗”是续断药材传统的产地加工方法，然而目前产地加工大都摒弃此法。目前，尚没有针对此系统开展研究。本项目围绕“发汗”对续断化学成分以及药效的影响开展研究，以期为续断的产地加工提供指导。.主要研究内容：采用近红外光谱技术，研究建立续断“发汗”品与未“发汗”品的近红外光谱快速鉴别模型；研究建立续断“发汗”前后体内外HPLC指纹图谱，定性定量分析 “发汗”前后体内外化学成分的变化情况，明确续断“发汗”物质基础；研究续断“发汗”前后水煎液和含药血清对成骨细胞增殖、分化影响的差异，采用多维谱效及化学计量法，分析“发汗”前后化学成分的变化与药效变化的相关性，阐明续断产地加工“发汗”的机理。.研究结果：本项目采用近红外光谱技术，建立了续断“发汗”前后的快速鉴别模型，以及8种主要活性成分的快速定量模型，为续断药材及饮片的快速质量检测提供了新的方法；建立了续断发汗前后HPLC-DAD\CAD\ELSD\MS指纹图谱以及含药血清的HPLC-DAD指纹图谱。经研究发现，续断发汗后，总皂苷、浸出物、主要化学成分的含量均有明显降低(如川续断皂苷VI、马钱苷、绿原酸、异绿原酸A、马钱苷酸、常春藤皂苷元)，部分成分（如咖啡酸、异绿原酸B\C）略有升高；改变了挥发油内成分及组成比例。续断发汗后主要成分川续断皂苷Ⅵ和马钱苷在大鼠体内的药代动力学参数均有所降低；其水煎液、含药血清对成骨细胞、G63细胞增殖分化作用均有降低。采用灰色关联度法，分析了多维指纹图谱和细胞增殖分化药效之间的关系，找出了“发汗”前后化学成分与药效的相关性，推断出了续断发汗前后的物质基础主要为皂苷类（如川续断皂苷VI、川续断皂苷X、续断苷B、川续断皂苷IV系列异构体等）、有机酸类（如绿原酸、异绿原酸A\B\C、咖啡酸）、环烯醚萜苷类（如马钱苷、马钱苷酸、茶茱萸苷）。.通过项目研究，发现续断经产地加工“发汗”后，对续断化学成分及相关药效均有明显的影响。该研究成果可为续断产地加工提供科学指导。