产多种尿毒症毒素分解酶的基因工程菌的构建及功能研究

肠道细菌疗法是近年来兴起的治疗慢性肾衰的方法，其基本策略是将高产尿毒症毒素分解酶的自然菌或高效表达的酶基因转入特定菌种，经培养后摄入消化道降解相应的毒素。但目前仅见于单种酶的菌种如尿素酶或尿酸酶。不适应肾衰状态下多种毒素作用的病理特点。本课题用多种尿毒素分解酶基因，即高产尿酸氧化酶（简称尿酸酶）的产朊假丝酵母菌的尿酸酶基因和高产肌酐酶的肺炎克雷伯菌肌酐酶基因，分别转入大肠杆菌得到重组质粒，并在这两种基因重组的质粒构建得到启动子串联表达肌酐和尿酸分解酶基因的重组质粒，再转化已能分泌尿素酶的乳酸杆菌，得到肌酐酶、尿酸酶高表达的转化子菌株，使乳酸杆菌同时能产生肌酐、尿素和尿酸分解酶，将该重组菌培养制成活菌制剂，然后摄入慢性肾衰SD大鼠消化道，使其定植于消化道粘膜，并繁殖生长不断转代，达到持续分解尿毒素的作用。可望为慢性肾衰的治疗带来革命性突破。