Linc00673及Linc00673-miR-150轴在肺癌上皮间质转化中的作用及分子机制研究

Long non-coding RNAs (lncRNA) and microRNAs (miR) are known to play critical roles in epigenetic regulations. Long non-coding RNA Linc00673 was a recently identified lung adenocarcinoma-related lncRNA while its exact role in cancer remains elusive. Preliminary data from our laboratory indicate that Linc00673 could not only promote proliferation, migration and invasion of lung cancer cells, but also interact with miR-150 to regulate the epithelial-mesenchymal transition (EMT) process of lung cancer cells. So far the study between Linc00673 and EMT has not been reported. In this study, we aim to elucidate the biological function of Linc00673 and the Linc00673-miR-150 axis in lung cancer, to understand the regulatory effect of the Linc00673-miR-150 axis on EMT, and to explore the influnce of Linc00673 and Linc00673-miR-150 axis on EMT signaling pathway by overexpression or knockdown of Linc00673. Furthermore, we will identify the downstream molecular targets and their biological functions of Linc00673 and the Linc00673-miR-150 axis using the Chromatin Isolation by RNA Purification (ChIRP) and the next-generation sequencing. Taken together, completion of our study will establish a novel carcinogenesis mechanism in lung cancer involving LncRNAs and EMT, and lay a foundation for finding novel molecular targets for diagnosis and therapy of lung cancer.

长链非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miR)在表观遗传中发挥重要作用。Linc00673是本课题组近来筛选到的一个新型lncRNA，初步研究发现Linc00673具有促进肺癌细胞增殖、迁移及侵袭的功能，且可与miR-150作用形成lncRNA-miR轴来共同调控肺癌细胞的上皮间质转化(EMT)过程，而有关Linc00673与EMT的研究迄今未见报道。本项目拟采用过表达载体和RNA干扰等技术，研究Linc00673在肺癌EMT中的作用，明确Linc00673及Linc00673-miR-150轴对EMT信号通路的影响，以ChIRP技术寻找Linc00673-miR-150轴作用的靶基因并验证其功能。本项目的完成有望阐明Linc00673及Linc00673-miR-150轴对肺癌EMT的调控作用及其促肿瘤发生发展的机制，找到肺癌诊断及治疗的新靶点，具有重要的理论意义和潜在应用价值。

长链非编码RNA（lncRNA）和微小RNA（miRNA）在表观遗传中发挥重要作用。本课题组前期研究发现lncRNA Linc00673具有促进肺癌细胞增殖、迁移及侵袭的功能，并且可与miR-150作用形成lncRNA-miR轴来共同调控肺癌细胞的上皮间质转化（EMT）过程，推测Linc00673可能在调控肺癌细胞EMT过程以及肿瘤细胞生物学行为当中发挥重要作用。我们进一步通过过表达载体和小干扰RNA技术等一系列细胞分子生物学技术研究Linc00673/miR-150轴在EMT信号通路中的作用，并在动物体内实验及人群研究中进行了验证。Linc00673存在5种异构体，且异构体间的生物学功能存在一定差异。我们的研究表明， Linc00673-V3异构体在肺癌细胞中高表达，并能够直接促进肿瘤进展，，利用RAP-MS技术筛选鉴定到与Linc00673-V3直接作用的靶蛋白SMAD3，随后进一步探究了Linc00673-V3与Smad3相互作用调控肿瘤进展的分子机制。此外，还解析了Linc00673/Smad3分子轴促进肺癌进展的调控网络。上述结果为肺癌细胞的EMT调控提供了新的分子机制，并为研究lncRNA在肿瘤细胞生物学行为中的作用提供了新的研究思路。