γδT细胞识别的结核杆菌蛋白抗原的筛选与鉴定

γδT细胞由于其在结核感染中发挥越来越重要的作用而成为抗结核疫苗研究的热点。研究表明，结核杆菌的磷酸抗原如IPP等能有效地活化γδT细胞，被认为是γδT细胞识别的主要抗原，但活化后的γδT细胞谱系广泛，无法实现有效地抑制结核杆菌复制的功能。而结核杆菌蛋白提取物中存在有效的激活γδT细胞的成分，蛋白抗原活化后的γδT细胞能有效抑制结核杆菌的生长。但到目前为止，仍未发现确定的可活化γδT细胞的结核杆菌蛋白抗原或抗原表位，限制了其在抗结核感染领域的应用。本课题中，我们首先对结核病人特异性γδTCR序列进行分析，并构建结核反应性γδTCR转染细胞系和结核特异性γδTCR-Fc融合蛋白。分别使用γδTCR-Fc融合蛋白和转染细胞系为探针，顺序筛选结核基因组随机表达文库，将获取的γδT细胞识别的结核杆菌蛋白抗原或表位进行功能分析。为开发γδT细胞激活型结核疫苗或佐剂提供理论基础。

γδT细胞由于其在结核感染中发挥越来越重要的作用而成为抗结核疫苗研究的热点。研究表明，结核杆菌的蛋白抗原活化的γδT细胞能有效抑制结核杆菌的生长。但到目前为止，仍未发现确定的可活化γδT细胞的结核杆菌蛋白抗原或抗原表位，限制了其在抗结核感染领域的应用。本项目围绕γδT细胞识别的结核杆菌蛋白抗原这一关键科学问题，以获得有效的抗结核疫苗或佐剂成分为目标，建立了筛选γδT细胞识别的蛋白抗原的技术平台、获得了肺结核特异性γδTCR优势的CDR3序列、筛选到了新的γδT细胞识别的肺结核特异性蛋白抗原DXS2和短肽EP。DXS2蛋白和EP肽活化的肺结核病人外周血中的γδT细胞分泌具有杀伤功能和趋化功能的细胞因子，在γδT细胞介导的细胞毒作用和趋化单核细胞到达感染部位中发挥重要的作用。总之，我们的研究为获得潜在的有效抗结核疫苗或佐剂成分开拓了新的思路。