T细胞识别的鳞状细胞癌1型抗原增强干扰素-α抗丙型肝炎病毒作用的研究

丙型肝炎病毒（HCV）感染是严重的公共卫生问题。研究干扰素 α（IFN-α）治疗HCV不应答的机制有助于提高疗效。在前期发现"沉默"T细胞识别的鳞状细胞癌1型抗原（SART1）表达使IFN-α抗HCV作用明显降低的基础上，以JFH1（基因2a型HCV病毒株）感染的Huh7.5.1（肝癌细胞株）细胞为主要研究平台，干扰SART1表达（小干扰RNA"沉默"或质粒"过表达"），用免疫印迹、定量聚合酶链反应等方法，阐明SART1增强IFN-α抗HCV的作用；用荧光定量分析、免疫印迹、和定量聚合酶链反应等方法，研究SART1对干扰素刺激应答元件转录和上游信号活化/下游抗病毒蛋白合成的影响；用干扰素信号传导通路阻断剂和核转录因子 κB（NF-κB）活化抑制剂，进一步研究SART1影响抗病毒蛋白合成的通路及与NF-κB活化的关系，从而阐明SART1增强IFN-α抗HCV的机制，为提高临床疗效奠定基础。

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染是严重的公共卫生问题。研究干扰素-α（interferon-α，IFN-α）治疗HCV 不应答的机制有助于提高疗效。以JFH1（基因2a 型HCV 病毒株）感染的Huh7.5.1（肝癌细胞株）细胞为主要研究平台，干扰SART1 表达（小干扰RNA"沉默"或质粒"过表达"），用荧光定量分析、免疫印迹、定量聚合酶链反应等方法，阐明SART1 增强IFN-α抗HCV 的作用，SART1通过调控抗病毒蛋白（OAS、MxA、PKR）的表达发挥抗HCV作用；用干扰素信号传导通路阻断剂等，阐明SART1通过IFN-α的非经典抗病毒信号通路（P38MAPK）协同IFN-α的抗HCV作用。SART1、延伸因子结合蛋白（elongation factor Tu GTP binding domain containing 2，EFTUD2）、剪切因子3A3（splicing factor 3A 3，SF3A3）、剪接因子3B1（splicing factor 3B subunit 1，SF3B1）均为人类剪切体的组成成分。我们的研究发现，这4个人类基因与HCV复制及IFN-a的抗HCV作用密切相关。SART1、EFTUD2和SF3A3均经过非经典的干扰素抗病毒信号通路，启动MxA、OAS的转录和表达水平，抑制HCV复制。而SF3B1、HCV core、NF-kB三者间的同步变化，提示SF3B1作为抗HCV靶点的可能性。.我们的研究结果展示了人类剪切体组分和HCV复制间复杂的相互作用，提示剪切相关人类基因在HCV复制、IFN-a抗HCV中的重要作用，不但为深入理解IFN-a的抗病毒作用提供了新的研究思路，也为抑制HCV复制提供可能的作用靶点。