Neuroligin干扰肽调控NMDA受体及其在神经损伤中的应用

Neuroligin(NLG)是一种细胞粘附分子家族，与neurexinsβ一起调节突触前神经递质释放并诱导PSD-95（突触后密集蛋白）在突触后的簇集。NLG-PSD95复合体调控Ca2+通道的开放，在介导和整合N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体信号转导中具有关键性作用。NMDA 受体过度激活产生兴奋性毒性作用可导致脑损伤, 而抑制PSD95的表达或PSD95与NMDA受体的结合，阻断NMDA受体磷酸化则对兴奋性毒性导致缺血性脑损伤有保护作用。单一PSD95短肽由于只干扰PSD95与NMDA受体结合但不能阻断NMDA受体磷酸化而效果受限。本课题构建表达并纯化GST-NLG 融合蛋白载体，分析NLG 融合蛋白对PSD95 等相关蛋白的抑制效应，筛选特异性NLG干扰短肽，并通过SD大鼠脑缺血模型，观测干扰短肽对神经细胞的保护作用，以此寻找新的治疗神经疾病模式和生物制剂。

本课题的总体目标是构建表达并纯化GST-NLG 融合蛋白载体，分析NLG 融合蛋白对PSD95，Src 等相关蛋白的抑制效应，筛选特异性NLG干扰短肽，并通过动物脑缺血模型，神经性疼痛动物模型试验，观测干扰短肽对神经细胞的保护作用及对疼痛的抑制效应，以此寻找新的治疗神经疾病模式和生物制剂。课题组紧紧围绕既定研究目标，密切关注国际、国内研究热点，积极跟踪国际前沿，创造性的完成了如下研究工作：1）PSD-95是兴奋性突触形成和成熟的关键因子，构建的PSD-95 siRNA 在海马培养神经元中导致PSD-95, NLG1和NLG3在兴奋性突触内缺失, 引起兴奋性突触降低；2）利用大鼠脑缺血再灌注模型发现了脑缺血再灌注后睾酮降低的机制；3）利用阿尔茨海默病模型大鼠，发现了水飞蓟宾可改善学习记忆功能，其机制可能与其抗自由基活性有关。.通过本课题的实施，正式发表研究论文2篇，其中SCI文章1篇（CMJ. 2010）国家核心期刊1篇，以本课题为载体，培养青年教师2名、硕士研究生2名。