制首乌致肝损伤"毒-证"机制研究及代谢靶标分析

Although clinical system in radix polygoni multiflori to cases of drug-induced liver damage occurs frequently, but for the cause of liver damage mechanism of the research conducted is still less, therefore, in-depth study of radix polygoni multiflori to the mechanism of action of liver damage is necessary. This topic according to the relationship of drug toxicity and liver mitochondrial energy metabolism and renal Yang deficiency and kidney Yin deficiency syndromes expression may be closely related to mitochondrial energy metabolism is proposed based on the system the radix polygoni multiflori "toxic, targeted syndrome, and mitochondrial energy metabolism related hypothesis, and through the system of radix polygoni multiflori induction of different syndrome of rats liver cell apoptosis and mitochondrial function, MPTP (mitochondrial membrane permeability transport hole) studies of open discussion of radix polygoni multiflori" poison - certificate "associated molecular mechanism, in order to further reveal the mechanism of radix polygoni multiflori cause liver damage. At the same time, proposed to reflect the liver injury and dysfunction of mitochondrial energy metabolism of particular group is divided into target, through the metabonomics method to find the early biomarkers of hepatic toxicity of radix polygoni multiflori.

尽管临床中制首乌致药物性肝损伤的病例时有发生，但对于其引起肝损伤机制的研究开展依然较少，因此深入研究制首乌致肝损伤的作用机制十分必要。本课题根据药物毒性与肝线粒体能量代谢的关系以及肾阳虚、肾阴虚的证候表达也可能与线粒体能量代谢密切相关的基础之上提出了制首乌的"毒性-靶向证候-线粒体能量代谢"关联假说，并通过制首乌诱导不同证候大鼠肝细胞凋亡与线粒体功能、MPTP（线粒体膜通透性转运孔）开放的相关研究，探讨制首乌 "毒－证"关联的分子生物学机制，以期进一步揭示制首乌致肝损伤的作用机理。同时，拟以能够反映肝脏损伤及线粒体能量代谢功能异常的特定组分为靶标，通过代谢组学方法寻找制首乌肝毒性的早期生物标志物。

中药肝损伤已经成为社会热点问题，何首乌为蓼科植物何首乌的干燥块根，其炮制品历来为古今医家所推崇，是多种补血类中成药、保健食品中的主要成分之一。但近些年关于服用何首乌导致药物性肝损伤的病例时有发生，因此深入研究何首乌导致肝损伤的发生原因及机理，对于指导何首乌临床的安全使用有着积极的意义。.近些年虽然有部分学者对于何首乌肝毒性进行了部分研究，但基本上均借用化学药品毒性研究方法进行研究，忽视了中医基础理论的指导作用，忽视了何首乌毒性与证候之间的关联性。而早在《黄帝内经》中记载的“有故无殒”思想就强调了药与证之间的密切联系，认为不能隔裂药证之间的关系而孤立地评价药物。基于此，本课题基于中医证候研究的基础上，提出了何首乌“毒性–靶向证候–线粒体能量代谢” 关联假说，基于该假说，我们开展了何首乌对肾阴虚、肾阳虚证候模型大鼠肝损伤的分子生物学以及代谢组学研究，通过研究我们发现：. 1、何首乌致肝损伤的程度与中医证候具有相关性，其中何首乌非对证治疗肾阳虚证候时其肝毒性明显强于对证治疗肾阴虚证候。. 2、何首乌可降低肝细胞清除氧自由基的能力以及肝细胞线粒体SDH和呼吸链复合物Ⅰ活性，影响NADH呼吸链功能而引起细胞代谢障碍，并通过上调Fas、FasL蛋白和细胞凋亡促进因子Bax的表达，下调凋亡抑制因子Bcl-2进而诱导肝细胞凋亡，这是何首乌导致肝损伤的作用机制之一。. 3、LPC（溶血磷脂酰胆碱）类化合物及色氨酸化合物可能是何首乌致肝损伤早期生物标记物。. 总之，本课题结果为科学、客观地评价制首乌肝毒性，早期预防何首乌导致肝损伤的发生提供了实验依据，也为有毒中药建立合理的毒性预警机制提供了新的研究思路。