KLF13通过QKI-6调控circHIPK3的生成影响胶质瘤细胞恶性生物学行为的机制研究

Human gliomas are the most common and malignant type of primary brain tumors with the character of high fatality and recurrence rate. We firstly reported that QKI-6 was up-regulation in glioma tissues. Previous researches found that transcription factor KLF13 was up-regulation in glioma tissues, KLF13 could affect the expression of QKI-6. CircHIPK3 was found overexpression in the glioma tissues. Recent research found QKI could promote the circular RNA formation, so whether QKI-6 could promote circHIPK3 formation and whether the altered expression of circHIPK3 participate the effect of KLF13 on the malignant biological behaviors of glioma are still unknown. Combined the researches statuses and our previous works, in this study, luciferase report gene expression analysis are used ①to identify the direct action and pivotal combined site between KLF13 and QKI-6 gene，②to identify whether KLF13 influence the formation of circHIPK3 via regulating QKI-6,③to identify the regulation mechanism between QKI-6 and circHIPK3，④ to identify whether circHIPK3 influence the malignant biological behaviors of glioma via regulating miR-654. The results of this study can reveal the mechanism of KLF13 regulate the malignant biological behaviors of glioma, and provide the theoretical evidence and new target points to the research and therapy of glioma.

脑胶质瘤是发病率最高的颅内原发恶性肿瘤，具有高致死率，易复发的特点。我们首次报道了QKI-6基因在人脑胶质瘤组织中表达上调,前期研究发现，转录因子KLF13在胶质瘤中起促癌基因作用，并调控QKI-6的表达；circHIPK3在胶质瘤组织中过表达。近期有报道QKI基因可以促进环状RNA生成，但QKI-6是否可以影响circHIPK3的生成，circHIPK3表达的变化是否与KLF13对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响有关，目前尚未得知。本研究通过荧光素酶报告基因等方法，①明确KLF13是否与QKI-6靶向结合；②明确KLF13是否通过调控QKI-6影响circHIPK3的生成；③明确QKI-6与circHIPK3的调控方式；④明确circHIPK3是否通过与miR-654竞争性结合，调控HDGF的表达，影响胶质瘤细胞的恶性生物学行为。本研究希望能为胶质瘤治疗提供新的靶点和实验理论依据。

胶质瘤目前仍然是颅内原发恶性肿瘤中发病率最高肿瘤，由于胶质瘤致死性较高并且常规治疗方法疗效差，越来越多的研究者致力于针对分子靶点研发新的治疗手段，包括肿瘤标志物、异常的信号途径、肿瘤血管抑制剂和肿瘤免疫治疗等。. 本课题主要研究：KLF13，QKI-6，circHIPK3，miR-654在胶质瘤组织及细胞系中的内源性表达；研究过表达及表达沉默KLF13，circHIPK3和miR-654后胶质瘤细胞增殖，迁移侵袭和凋亡能力的变化；研究QKI-6，circHIPK3，miR-654是否参与到KLF13对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响中去，以及相互之间是否存在结合位点；实验结果提示在胶质瘤组织及细胞系中KLF13，QKI-6，circHIPK3呈高表达，miR-654呈低表达。过表达KLF13，circHIPK3后可以促进胶质瘤细胞的增殖，迁移侵袭，抑制其凋亡；表达沉默KLF13，circHIPK3后可以抑制胶质瘤细胞的增殖，迁移侵袭，促进其凋亡。KLF13和QKI-6之间存在直接结合位点，QKI-6，circHIPK3，miR-654与HDGF的表达受KLF13表达变化的影响。实验同时证实miR-654与HDGF存在结合位点且miR-654的表达变化直接影响HDGF的表达变化。经过实验分别构建KLF13和QKI-6，circHIPK3与miR-654共转染的胶质瘤细胞系，结果证实KLF13/QKI-6/circHIPK3/miR-654/HDGF共同参与对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。. 本课题通过研究证实KLF13/QKI-6/circHIPK3/miR-654/HDGF轴与胶质瘤细胞恶性生物学行为有关。我们希望通过这种持续深入的研究，不仅可以揭示胶质瘤的发病机制，也有利于发现更有效的分子靶向治疗方法，突破胶质瘤治疗的瓶颈。