深海来源真菌活性产物及其药用资源开发相关基础研究

微生物是一类重要的自然资源，在工业、农业、材料、医药等方面广泛应用。相对于陆地微生物，深海这样一种特殊生境下的微生物资源就显得十分珍贵。本项目的研究工作主要以已经获取得到来源于深海环境下的18株真菌菌株为研究对象，对这些菌株的药用潜力进行研究。具体内容包括：以体外模型测试18株深海真菌的抗肿瘤、抗菌活性，对于活性较突出的菌株，优化其培养条件，对其次级代谢产物进行系统分离，寻找结构新颖、具有药用潜力的先导化合物。而对于无活性的真菌，则通过代谢功能改造对其进行活性化转化，获得活性突变菌株进行次级代谢产物的研究。本项目旨在揭示深海真菌中的活性次级代谢物，同时将抗生素抗性筛选的方法由陆生真菌拓展应用到深海真菌中，为有效利用深海微生物资源提供理论依据和实例。

微生物是一类重要的自然资源，在工业、农业、材料、医药等方面广泛应用。相对于陆地微生物，深海这样一种特殊生境下的微生物资源就显得十分珍贵。本项目研究工作主要以来源于深海环境下的17株真菌菌株为研究对象，分别采用MTT法和纸片法测试17株深海真菌代谢产物对5株人癌细胞及3株病原真菌的抑制活性。根据活性测试结果，选取其中具有抗肿瘤活性的3株真菌（淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus ZBY-1、塔宾曲霉Aspergillus tubingensis 19-01、曲霉属真菌Aspergillus sp 16-02-1）进行发酵培养，采用活性跟踪分离模式，利用各种色谱技术分离纯化，并根据理化和波谱数据鉴定其中20个化合物，分别为由19-01中分离得到5个化合物：环-(L-脯氨-L-亮氨酸)（1）、环(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)（2）、N-乙酰基-色氨酸（3）、malformin A（4）、过氧化麦角甾醇（5）；由16-02-1中分离得到8个化合物：新曲霉酸（6）、ferrineoaspergillin（7）、(2'S)-4-甲氧基-3-(2'-甲基-3'-羟基)丙酰基-苯甲酸甲酯（8）、黄曲霉素（9）、环(反式-4-羟基-L-脯氨-L-亮氨酸) （10）、环(反式-4-羟基-L-脯氨酸-L-苯丙氨酸) （11）、尿嘧啶（12）和(11S)-新羟基曲霉酸（13）；由ZBY-1中分离得到7个化合物：9(11)-去氢过氧化麦角甾醇（14）、过氧化麦角甾醇（15）、(22E,24R)-5α,6α-环氧-3β-羟基麦角甾-22-烯-7-酮（16）和脑苷脂 A（17）、B（18）、C（19）、D（20），其中化合物4～16对4株肿瘤细胞（K562、HL-60、HeLa、BGC-823）显出不同程度的抗肿瘤活性。.利用超声波介导的新霉素抗性筛选方法对1株深海来源无活性真菌杂色曲霉（Aspergillus versicolor ZBY-3）进行活性化转化的研究，共获得30株抗性突变菌株，经活性筛选，其中6株突变株显示出抗肿瘤活性，活性化转化率达到20%，目前正在进行活性突变株新产活性产物的研究工作。.本研究旨在初步阐述具有药用潜能的深海来源活性真菌代谢产物的特征，同时阐明应用抗生素抗性筛选方法对深海来源无活性真菌进行活性化转化的可行性，从而为更好地利用深海稀有菌株提供依据。