杜仲内生真菌中抑制植物病原菌活性物质的研究

利用生物防治的方法进行植物病原菌控制近年来发展迅速，利用生物之间拮抗作用防治病原菌具有安全、无毒、高效的特点，植物内生真菌是一类重要的真菌资源，近年来从不同植物中分离了大量的内生真菌，有些真菌具有很强的抗病毒、抗真菌作用，并分离了不少高活性的化合物，为生物源农药的开发和利用开辟了新的道路。杜仲是一种重要的中药材，其内生真菌研究取得了很大的进展，尤其是医学上具有较强的抗病毒作用，但是对于杜仲内生真菌对植物病原菌的研究并不多见，限制了该类菌群的开发和综合利用。本研究从安徽地区多个地方采取杜仲根、茎、叶、花等器官，从中分离内生真菌，利用离体和活体等方式对杜仲内生真菌进行抑制植物病原菌活性的筛选，并对高活性抑菌发酵液提取物中的化学成分展开研究，纯化一批新型生物活性化合物单体或先导化合物，并对其中的化学物纯品进行结构分析，为筛选新型内生病原防治真菌和开发生物防治农药开发提供借鉴。

该项目研究计划的要点是以安徽省境内霍山、黄山以及合肥三地区药用植物杜仲健康的根、茎、叶、花等器官为材料，进行内生真菌的分离纯化，共获得杜仲内生真菌386株，归类为16个属，共77种；且77种内生真菌次生代谢产物的甲醇粗提物对10种植物病原菌均有不同程度的抑菌效果；离体菌丝生长速率法及活体盆栽实验显示DZY04、DZJ04、DZGS10、DZY14四种内生真菌次生代谢产物的甲醇粗提物的抑菌活性较好；利用多种色谱分离技术，对具有高抑菌活性的4株内生真菌次生代谢产物的甲醇提取物展开研究，共分离纯化得到8种活性化合物单体，明确了内生真菌次生代谢产物的甲醇提取物的抑菌机理，并通过毒性药理试验等对8种化合物单体中具有较好抑菌活性的6种化合物进行化学安全性的相关评价探讨，明晰了6种化合物均属无毒类物质，从而为杜仲内生真菌的开发、筛选新型内生微生物防治病原真菌以及开发生物农药开发提供理论基础。