树突状细胞向破骨细胞转分化在骨髓瘤骨病中的作用及其机制研究

骨髓瘤骨病（MBD）是因多发性骨髓瘤（MM）细胞与破骨细胞（OC）相互作用的恶性循环而导致进行性骨质破坏，严重影响 MM 患者的生存质量和预后。近年研究发现免疫系统和骨系统关系密切，参与免疫调节的树突状细胞（DC）在MM环境下可以细胞融合方式转分化为参与骨重建的OC，且是比单核细胞更具分化效率的、更接近OC的前体细胞。因此，深入研究MM环境下DC转分化为OC的机制具有重要意义。本研究项目拟分别通过在临床层面和MM裸鼠动物模型进一步证实DC向OC转分化在MBD发病机制中的作用，采用基因芯片技术深入研究MM环境下DC 转分化为OC过程的表达谱变化并分析关键基因的调控网络和信号通路，并将在前期研究树突状细胞-特异性跨膜蛋白（DC-STAMP）的基础上，采用靶向干扰技术分析抑制DC-STAMP表达对MM来源DC转分化为OC的影响，以期进一步阐明MBD发病机制并为其靶点治疗提供理论和实验依据。

本研究采用流式细胞术、TRAP 染色和甲苯胺蓝染色等手段证实了未成熟树突状细胞在体外一定条件下可向破骨细胞转分化。采用免疫磁珠分选法可获得高纯度的CD14+单核细胞，其在GM-CSF和IL-4诱导5-6天后，未成熟DC相关细胞表面分子（CD86、CD40和CD1a）明显增加，但再经RANKL和M-CSF诱导至第14天时，未成熟DC相关细胞表面分子下降，而破骨细胞相关抗原CD51/61明显增加，经TRAP染色可见多核细胞胞浆内均有紫红色的阳性颗粒，且具有骨吸收功能。上述结果证实了未成熟树突状细胞可转分化具有骨吸收功能的破骨细胞，这为认识骨髓瘤骨病新的发病机制提供理论依据。