人参皂苷aPPD在肝细胞癌中通过脂筏对TLR7表达的调节作用

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common and highest malignant tumor in the world. The onset of HCC is closely related to hepatitis B virus (HBV). Molecular targeted therapy has become the rising focus on treatment of cancer in recent years. Studies have shown that toll-like receptor 7 (TLR7) can mediate the antiviral immune response. The ligand recognition of TLR7 needs lipid rafts to provide the signal platform to start the immunoregulation. The tightly bound lipids in raft-microdomains benefit the formation of TLR7-MyD88 oligomeric protein complexes. These data emphasize the importance of lipid rafts in regulating TLR7 signaling pathway. Fu Zheng Pei Ben therapy as the basic treatment of improving immunity and removing pathogeny in HCC has shown a better clinical efficacy. This study aims to clarify the molecular mechanisms of lipid rafts regulating TLR7 expression on HBV-infected HCC treatment with Fu Zheng Pei Ben. Through the analysis of changes of TLR7 protein expression, distribution and structure in lipid rafts after aPPD treatment, explore the molecular mechanisms of Fu Zheng Pei Ben therapy and provide a new drug target for HCC treatment.

肝细胞癌（HCC）是世界范围内最常见且恶性度最高的肿瘤之一， 其发病与HBV感染密切相关。分子靶向治疗药物是近年来治疗癌症的新宠。研究表明， TLR7介导抗病毒免疫应答，对其配体的识别需要脂筏提供信号平台启动免疫调节，而脂筏微区紧密结合的脂质有利于TLR7-MyD88寡聚蛋白复合物的形成。这些数据强调了脂筏在调节TLR7信号通路的重要性。以扶正培本法作为肝癌的基础治疗方法在提高人体抗病能力，帮助机体抵御和祛除病邪方面显示了较好的临床疗效。本研究旨在阐明以扶正培本法作为肝癌基础治疗方法的分子机制，以人参皂苷aPPD为工具药，分别通过人体生物标本、体外细胞培养和肝癌小鼠模型，研究TLR7蛋白在脂筏区表达量、位置分布的变化和结构功能的异常，调控肝癌病人TLR7的功能，探索基于脂筏调节TLR7表达治疗肝癌的分子机制，为肝癌治疗提供新的药物靶点。

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是世界范围内最常见且恶性度最高的肿瘤之一。中医药及其他新技术、新药物结合的综合治疗已在肿瘤治疗领域广泛认可。人参是目前研究最多的具有抗癌作用的传统中药之一，20（S）-原人参二醇（aPPD）人参皂苷是其中主要活性成分之一。该研究以aPPD在HCC中通过脂筏对TLR7表达的调节作用为切入点，发现HCC组织、瘤细胞中脂筏异常、TLR7蛋白在脂筏区表达量上调，脂筏含量与TLR7信号激活呈正相关；阐明了脂筏通过调控HCC细胞TLR7的表达和下游NFkB信号参与HCC进展，TLR7激活与HCC细胞增殖与迁移能力的增加密切相关。进一步发现aPPD通过干扰脂筏，改变质膜流动性及微环境，影响脂筏蛋白之间的相互作用及下游信号转导，从而达到对HCC细胞的抑制作用。研究发现不仅提示脂筏可作为HCC治疗的潜在分子干预靶点，还为基于中医扶正培本法研发aPPD作为HCC辅助性治疗药物提供了分子机制支撑。.基于HCC脂筏分布及胆固醇成分含量异常，从脂质代谢调控分子入手，我们通过临床队列与实验研究相结合，发现了脂质代谢关键分子卵磷脂-胆甾醇乙酰转移酶(Lecithin-cholesterol acyltransferase, LCAT)通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路影响HCC的增殖、转移及侵袭，LCAT的异常表达受甲基化转移酶DNMT1的调控，并进一步阐明了LCAT在HCC早期诊断及预后评估中的临床意义。.拓展研究探讨了aPPD在肝衰竭中的保护作用及分子机制，研究发现aPPD与HSP70相互作用并抑制HSP70的生物学活性，aPPD在小鼠急性肝衰竭模型上具有抑制炎症和改善肝损伤的作用。 .总之，本项目按计划任务书完成了HCC脂筏变化、TLR7表达分布异常及其相关的分子基础研究；基于HCC脂质代谢紊乱发现了HCC发生发展的新型标志分子LCAT，并阐明了其分子作用机制。研究结果揭示aPPD作为天然活性分子对HCC具有较好的治疗潜能，为中医扶正培本法在抗肿瘤治疗领域的应用提供了分子机制支持。此外，拓展研究发现了aPPD通过与HSP70相互作用，具有显著改善急性肝衰竭的作用。项目研究结果已发表SCI论文4篇，正在投稿2篇。相关研究发现申请国家发明专利通过初审1项。