过表达TIMP-1对NOD鼠糖尿病发生的影响及机制研究

1型糖尿病（DM1）是严重威胁人类健康的疾病之一，但目前尚缺乏彻底有效的防治手段。抑制自身免疫反应、拮抗细胞凋亡及刺激胰岛β细胞增殖是近年研究热点。研究显示，金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1可以促进胰岛β细胞增殖并拮抗凋亡，因此可能成为DM1治疗的新靶点。我们前期研究首次证实，TIMP-1过表达可以拮抗高糖高脂毒性引起的β细胞死亡以及多次小剂量链脲佐菌素诱导的血糖升高。结合预实验结果，本研究拟通过体内转导证实TIMP-1过表达对DM1自发动物模型非肥胖糖尿病（NOD）小鼠糖尿病发生的保护作用，并从调节免疫细胞浸润、活化，诱导免疫耐受，改善免疫失衡减轻胰岛炎及抗凋亡、促增殖等多个途径探讨TIMP-1延缓或预防DM1发生的机制，为开拓DM1防治新途径提供实验依据。

本研究利用第三代慢病毒包装系统 (pMDL、pVSVG、pRey、VeGFP），成功包装了eGFP标记的mTimp-1重组慢病毒，并通过免疫荧光及Western-Blot证实所制备病毒感染靶细胞（大鼠系膜细胞及NOD鼠来源的胰岛NIT-1细胞）和尾静脉注射后小鼠体内后均可持久、高水平表达目的基因，为mTimp-1在体内外病理生理过程中作用的研究提供有效手段。同时本实验中监测自发1型糖尿病(DM1)模型鼠-NOD鼠的代谢指标及胰岛病理后发现NOD鼠至25周龄糖尿病累计发生率为40%，并伴有严重胰岛炎。鉴于实验周期较短且执行方案较研究计划有所调整，目前部分结果尚在后期检测中，最终实验的完成将为Timp-1在1型糖尿病防治中的作用提供实验依据。