以已结题国家自然科学基金项目(30471115)的研究成果为基础,采用病毒诱导基因沉默技术鉴定茶氨酸合成的关键调控基因;通过生物信息学分析及化学发光-EMSA验证,从中筛选茶氨酸合成的关键反式调控元件;采用酵母细胞瞬间转化、酵母双杂交体系及DNaseⅠ足迹法分别研究反式调控元件的功能域、互作关系及转录因子结合位点;运用TAIL-PCR、荧光素酶报告基因和RLM-RACE分别克隆茶氨酸合成酶基因的启动子、分析其活性及确定转录起始位点;采用β-葡萄糖醛酸酶报告基因分析顺式元件与反式因子之间的相互作用。从转录水平阐明茶氨酸生物合成的基因调控机制,为进一步全面深入的研究茶氨酸生物合成的基因表达调控奠定不可或缺的基础,为大幅度提高茶叶中的茶氨酸水平寻求技术途径上的理论突破。
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数据更新时间:2023-05-31
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