桂枝加葛根汤对大鼠颈椎间盘细胞力学信号转导通路作用机制研究

本课题以周期性单轴应力应变于大鼠颈椎间盘细胞为研究对象，以中医传统理论为指导，采用桂枝加葛根汤中药血清干预周期性应力应变后纤维环细胞的方法，从细胞力学、生物化学和分子生物学的角度，探索桂枝加葛根汤通过调节应力应变后纤维环细胞Aggrecan基因表达与纤维环退变关系，以及通过对周期性单轴应力应变后Ca2+浓度及CaM、CaMK、CREB表达及定量的影响，阐明椎间盘细胞修复与Ca2+－CaM－CaMK－CREB通路信号转导内在关联，进一步明确桂枝加葛根汤中药效应的信息传递过程，深化中药防治颈椎病的理论研究，为临床颈椎病治疗提供理论基础。

本课题成功建立了稳定的大鼠椎间盘纤维环细胞体外培养体系并对其细胞表型进行鉴定，后续研究中以周期性单轴应力应变于大鼠颈椎间盘细胞为研究对象，以中医传统理论为指导，采用桂枝加葛根汤中药血清干预周期性应力应变后纤维环细胞的方法，从形态学、细胞力学、生物化学和分子生物学的角度，证实桂枝加葛根汤在通过剂量依赖的方式调节应力应变后纤维环细胞Aggrecan基因表达，以及通过上调纤维环细胞CaM和CaMKⅡ蛋白表达促进纤维环细胞的修复，从而阐明椎间盘细胞修复与Ca2+－CaM－CaMK－CREB通路信号转导内在关联，通过对中药单体的研究还发现桂枝加葛根汤的起效机制可能与抑制Fas/FasL信号转导通路有关，进一步明确桂枝加葛根汤中药效应的信息传递过程，深化中药防治颈椎病的理论研究，为临床颈椎病治疗提供理论基础。